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细胞培养的12个常见问题、可能原因及解决方法

1. 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损? 建议血清应保存在-2O℃。若一次无法用完一瓶,无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 将血清从冷冻箱取出后,置于2~8℃冰箱使之缓慢融解,一般是融解过夜。 2. 血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理? 沉淀主要成分是纤维蛋白和脂蛋白,不会影响血清品质。 首先让其沉淀在瓶子底部,中上层无沉淀血清直接转出使用,下层血清装到50ml无菌离心管,400g,离心3分钟即可除...

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科学家通过多种方法探究长链非编码RNA

直到今天,针对lncRNA的简洁且合理的分类系统仍遥不可及。 长链非编码RNA的概念模型 图片来源:Karissa Y. Sanbonmatsu 2013年,一群研究人员决定更加深入地挖掘一种名为H1的人类胚胎干细胞系,并且获得了一些惊喜。H1是最著名的干细胞系之一,但该团队还是成功发现了2000多个此前未被阐明的RNA片段。更重要的是,其中有146个为人类胚胎干细胞所独有,从而为研究多能性——变成体内任何细胞类型的能力——提供了诱人线...

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Real‐Time PCR数据分析

相对于只能半定量的常规PCR而言,qPCR的优点是既可以用于判断序列的有无,即定性,也可以用于确定DNA拷贝数,即定量。而且qPCR的结果无需通过电泳,而是通过计算荧光值来评估。由此可见,数据分析在qPCR这项实验中的份量。 qPCR 的数据分析可以分成相对定量和绝对定量两种。比如处理组细胞与对照组细胞相比,X 基因的mRNA 改变了多少倍,这就是相对定量;在一定数目的细胞中,X 基因的mRNA 有多少个拷贝,这就是绝对定量。通常我们在实验室用得最多的就是相对定量的方法,...

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线粒体生物合成调控子PGC1α将成为未来疾病治疗热点

急性肾损伤是一种突发性的肾脏功能缺失,许多不同因子,包括手术、化疗或休克都会引发急性肾脏损伤,目前研究者并不清楚为何肾脏会对这些应激因子如此敏感。肾脏是一种具有高度代谢性的器官,其通过线粒体的燃烧产能来产生大量ATP,从而促进肾脏过滤血液并且排除毒素,在肾脏中存在大量ATP及线粒体来完成这种关键的化学功能,线粒体或许可以作为一种必要且早期靶点来帮助抑制引发肾脏损伤的多种风险因子。 近日,有研究人员在Nature发表最新研究发现线粒体在肾脏损伤过程扮演着重要角色, ...

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一篇CRISPR英雄谱惹来的全球争议(附精译版)

与张峰同为麻省理工学院与哈佛大学Broad研究所主席兼主任Eric Lander在1月14日的《Cell》杂志上发表了一篇观点文章,简要介绍了精密基因编辑技术CRISPR背后的发展史,以及那些做出过突出贡献的人。然而,一石激起千层浪,一些批评者对此提出了激烈的反对意见。加州大学伯克利分校的Jennifer Doudna正与张锋及同事们陷入一场专利纠纷中,看到此文后,她在PubMed Commons网站上炮轰Lander,称他的描述“与事实不符”,Lander并未核实在关于她的实验室以...

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RNA的提取及逆转录RT-PCR操作步骤

第一步    RNA的提取 从液氮中取出组织后,快速的拿到超净台上,放入小皿中,加入trizol试剂,(100mg的组织放入1.2ml的trizol试剂),用注射器进行研磨,注意要熟练,快速研磨。(下面加的试剂按照1ml trizol的比例添加即可)。 细胞或组织加入Trizol研磨后,15~30℃孵育15min,使其充分裂解。(...

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祖传的Y染色体无用论坐实了?

近日,科学家的脑洞开到了极致,他们用两个基因替换了一整条Y染色体,搞出了“没有Y染色体”的可生育的“雄性小鼠”。小编不禁想问:难道Y染色体无用论坐实了? 饱受争议的Y染色体 据说有人是这样表白的:“姑娘,我有条祖传的染色体想送给你。。。”呵呵。早在1914年,诺贝尔奖得主,遗传学家赫曼·米勒就曾指出。人类性染色体,均来自常染色体;Y染色体上的几乎所有基因,都能在X染色体上找到等位基因。所以说,祖传的那条染色体,很有可能...

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环状RNA (CircRNA)360度剖析

CircRNA是一类以共价封闭环为特征,广泛存在于真核生物中的新型RNA分子。circRNA来源于基因的外显子或者内含子区域,在哺乳动物细胞中大量存在。现有研究表明大部分的circRNA在不同物种间是保守的。同时,由于其环状结构能抵抗RNase R的降解而比较稳定。circRNA由于其表达的特异性和调控的复杂性,以及在疾病发生中的重要作用越来越受到大家的重视。就像miRNA和长链非编码RNA一样,circRNA已经成为RNA领域的一个新的研究热点。 circRN...

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给你一款期刊格式神器:Comwriter

你或许还在为写一篇paper各种繁琐的细节而烦恼,文章每个部分的格式要求不同,不同杂志期刊的排版和格式要求也不一样。然而这些细节部分,处理起来也要花不少时间。今天燕子给大家安利一款神器—Comwriter。Comwriter致力于使学术写作更简单,可以快速锁定或者转换需要的格式(不同期刊、项目所需)、引文。简直就是格式灭,你只要安心写作,其他问题都交给它吧! 1.首先邮箱注册,根据你的研究方向建一个项目。 2.选择一种格式,Comwriter是唯...

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5个免费毕业论文查重网站介绍

毕业论文能否能过抄袭率检测,是即将毕业学生都发愁的事情,现在提供论文检测的机构主要来源于三大中文期刊数据库,即中国知网论文检测系统,万方论文相似性检测系统,维普通达检测系统。 现在应用较多的是中国知网和万方的检测系统,但是两者都不是免费的,只有维普通达注册后可以免费检测三次。 介于此考虑,在网上收集了一下,提供免费检测论文的几个网站。虽然与权威检测机构的检测结果不一定完全一致,但肯定对论文的修改是有一定帮助的。 1.维普通达检测系统 h...

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