人体微量全血培养是一种简单的淋巴细胞培养方法。此法采血量少、操作简便，在PHA作用下进行短期培养即可获丰富的、有丝分裂活跃的淋巴母细胞，适于制备核型标本。各种因素的效应(如病毒、电离辐射、化学药剂等)也可在淋巴细胞的培养条件下进行观察，从而进行多种在体内无法进行的研究。 1.  打开超净台紫外灯20~30分钟。 2.  洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台，点燃煤气灯。 3.  用75%酒精...

1.  在TAE电泳缓冲液中熔化3%~5%低熔点筛分型琼脂糖。将胶倒入普通琼脂糖凝胶装置中。 2.  与普通琼脂糖凝胶一样加样和电泳。（对2%的凝胶溴酚蓝迁移到大约50 bp） 3.  分离低熔点琼脂糖中片段。（对于＜1 000 bp 的片段回收的产量与用普通的低熔点琼脂糖相似，对于＜500 bp 的片段分离度可达到最高） ...

无丝分裂不仅是原核生物增殖的方式，而且雷马克(Remak)于1841年最早在鸡胚血细胞中也发现此现象，因为此过程没有出现纺锤丝和染色体的变化，故称无丝分裂(Ami- tosis)。其后无丝分裂又在各种动植物中陆续发现，尤其在分裂旺盛的细胞中更多见，但遗传物质平均分配否及其分裂的机制尚不十分清楚。 1.  蛙红细胞体积较大、数多，而且有核，是观察无丝分裂的较好材料。 2.  在高倍镜下，可见到处于不同阶段分裂过程中的蛙红细胞...

台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。 1.  将待染色细胞稀释至所需浓度。（方法及浓度范围与细胞计数相同） 2.  每0.1 ml 细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴，室温下染3~5 min 。 3.  染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放在高倍镜下观察。 ...

1.  将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。 2.  加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20分钟。 3.  将上清吸入另一试管中，留取沉淀物，加入0.1 ml 0.25 mol/L 蔗糖-0.003 mol/L 氯化钙溶液混匀成悬液（可用牙签）。 ...

1.  用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中，反复洗涤，尽量除去血污，用滤纸吸去表面的液体。 2.  将湿重约1 g 的肝组织放在小平皿中，用量筒量取8 ml 预冷的0.25 mol/L 蔗糖-0.003 mol/L 氯化钙溶液，先加少量该溶液于平皿中，尽量剪碎肝组织后，再全部加入。 3.  剪碎的肝组织倒入匀浆管中，使匀浆器下端浸入盛有冰块的器皿...

组织、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法来显示，其化学基础是利用过碘酸的氧化作用，打开碳链形成醛，生成的醛基与Schiff试剂中的无色品红反应形成紫红色化合物。 一、方法 1.  取1~2 mm 厚的肝组织块，用Carnoy氏液4℃固定4~6小时。 2.  乙醇脱水、二甲苯透明。石蜡包埋，切片。 3.  用70%乙醇展片。 4.  脱蜡：二...

过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。 一、方法 1.  取小鼠一只，以颈椎脱位法将其处死，迅速剖开其后肢暴露出股骨，将股骨一端斜向剪断，用PBS缓冲液湿润过的注射器针头吸出骨髓一滴滴到载玻片上。 2.  推片，室温晾干。 3.  将涂...

由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同，在pH值不同的溶液中，蛋白质分子所带的净电荷多少不同。如在生理条件下，整个蛋白质所带负电荷多，则为酸性蛋白质；带正电荷多，则为碱性蛋白质。据此，可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后，用不同pH值的固绿染液分别染色，细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。 一、方法 1.  以破坏脊髓法处死蟾蜍，将其腹面向上放人蜡盘中，剪开胸腔，打开心包。小心将心脏剪一小口，取心脏血一滴滴在干净...

细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力，且这两种染料的作用有选择性，甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色，呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量分析。 一、方法 1.  接种Hela细胞于盖片上并培养24~48小时，使长成单层。 2.  取出盖片，用PBS...