利用肿瘤细胞无限繁殖的特点，掌握其体外生长动态，取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面：1.  结构异常  即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变，包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2.  数目异常  由于肿瘤细胞分裂失去应有的调控，可出现亚二倍体、超二倍体和多一倍体数目异常现象。肿瘤细胞染色体制备技术在细胞生物学、医学遗传学的基础研究和临床诊断、愈后观察等方面均有广泛用途。 1.  ...

在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素，破坏细胞纺锤体的形成，使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞，低渗处理，使细胞胀大，染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质，使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片，然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。 1.  微量全血细胞培养至68小时左右，用1 ml 注射器号针头向每个5 ml 培养瓶内加2滴秋水仙素溶液。 2.  摇匀后继续培养3小时，此项操作不需要严格无...

人体微量全血培养是一种简单的淋巴细胞培养方法。此法采血量少、操作简便，在PHA作用下进行短期培养即可获丰富的、有丝分裂活跃的淋巴母细胞，适于制备核型标本。各种因素的效应(如病毒、电离辐射、化学药剂等)也可在淋巴细胞的培养条件下进行观察，从而进行多种在体内无法进行的研究。 1.  打开超净台紫外灯20~30分钟。 2.  洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台，点燃煤气灯。 3.  用75%酒精...

1.  在TAE电泳缓冲液中熔化3%~5%低熔点筛分型琼脂糖。将胶倒入普通琼脂糖凝胶装置中。 2.  与普通琼脂糖凝胶一样加样和电泳。（对2%的凝胶溴酚蓝迁移到大约50 bp） 3.  分离低熔点琼脂糖中片段。（对于＜1 000 bp 的片段回收的产量与用普通的低熔点琼脂糖相似，对于＜500 bp 的片段分离度可达到最高） ...

无丝分裂不仅是原核生物增殖的方式，而且雷马克(Remak)于1841年最早在鸡胚血细胞中也发现此现象，因为此过程没有出现纺锤丝和染色体的变化，故称无丝分裂(Ami- tosis)。其后无丝分裂又在各种动植物中陆续发现，尤其在分裂旺盛的细胞中更多见，但遗传物质平均分配否及其分裂的机制尚不十分清楚。 1.  蛙红细胞体积较大、数多，而且有核，是观察无丝分裂的较好材料。 2.  在高倍镜下，可见到处于不同阶段分裂过程中的蛙红细胞...

台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。 1.  将待染色细胞稀释至所需浓度。（方法及浓度范围与细胞计数相同） 2.  每0.1 ml 细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴，室温下染3~5 min 。 3.  染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放在高倍镜下观察。 ...

1.  将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。 2.  加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20分钟。 3.  将上清吸入另一试管中，留取沉淀物，加入0.1 ml 0.25 mol/L 蔗糖-0.003 mol/L 氯化钙溶液混匀成悬液（可用牙签）。 ...

1.  用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中，反复洗涤，尽量除去血污，用滤纸吸去表面的液体。 2.  将湿重约1 g 的肝组织放在小平皿中，用量筒量取8 ml 预冷的0.25 mol/L 蔗糖-0.003 mol/L 氯化钙溶液，先加少量该溶液于平皿中，尽量剪碎肝组织后，再全部加入。 3.  剪碎的肝组织倒入匀浆管中，使匀浆器下端浸入盛有冰块的器皿...

组织、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法来显示，其化学基础是利用过碘酸的氧化作用，打开碳链形成醛，生成的醛基与Schiff试剂中的无色品红反应形成紫红色化合物。 一、方法 1.  取1~2 mm 厚的肝组织块，用Carnoy氏液4℃固定4~6小时。 2.  乙醇脱水、二甲苯透明。石蜡包埋，切片。 3.  用70%乙醇展片。 4.  脱蜡：二...

过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。 一、方法 1.  取小鼠一只，以颈椎脱位法将其处死，迅速剖开其后肢暴露出股骨，将股骨一端斜向剪断，用PBS缓冲液湿润过的注射器针头吸出骨髓一滴滴到载玻片上。 2.  推片，室温晾干。 3.  将涂...