Tec真核表达载体构建及其对细胞信号的影响实验
研究认为Tec有肝组织与造血组织分布特异性,主要与EPO、EGF、IL6、GM CSF等细胞因子介导的信号转导途径密切相关,参与调控造血细胞尤其是淋巴细胞的增殖与分化。 一、材料准备 1. 细胞系培养条件:高糖DMEM,10%胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),37℃,5%CO 2 ,孵箱培养。 2. 人宫颈癌上...
查看详情研究认为Tec有肝组织与造血组织分布特异性,主要与EPO、EGF、IL6、GM CSF等细胞因子介导的信号转导途径密切相关,参与调控造血细胞尤其是淋巴细胞的增殖与分化。 一、材料准备 1. 细胞系培养条件:高糖DMEM,10%胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),37℃,5%CO 2 ,孵箱培养。 2. 人宫颈癌上...
查看详情藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。 切除软骨 1.自膝关节、肩关节和髋关节取软骨。由于胚胎或幼年供体的软骨比成年供体获得较多细胞,较长时间后才衰老,故胚胎或幼年供体的软骨优于成年供体。生后一个月的Fauve de Bourgogne 兔或新西兰兔较理想。然而,成年人手术切除的髋关节也是软骨细胞的合适来源。 2. 切除软骨之前,用 CDM (软骨切除培养液(cartilage d...
查看详情1. 染色:镀银 2. 肉眼观察: 脊髓横切面为椭圆形。灰质居中,着色较深,呈蝴蝶形,有四个突起,两个较粗短称前角灰质,两个较细长称后角灰质。白质在灰质的周围,着色淡黄。 3. 低倍镜观察: 白质着浅黄色,位于脊髓周围,为神经纤维集中处。神经纤维呈大小不等的圆形,髓鞘溶解,呈空泡状,其中黑色小点为轴突,其间散布着较小的圆形或椭圆形神经胶质细胞核。辨认灰质的前角和后角。前角...
查看详情转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(Rˉ,Mˉ),它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法(如电击法,CaCl 2 )处理后,细胞膜的通透性发生了暂时性的改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞(Competentcells)。进入受体细胞的DNA分子通过复制,表达实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选...
查看详情一、材料准备 1. 青霉素储存液 (1)将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8 ml去离子水中。 (2)分装为1 ml/管,-20℃保存。 2. 链霉素储存液 (1)将键霉素小瓶中的1 mg干粉充分溶解于10 ml去离子水中。 (2)分装为1 ml/管,-20℃保存。 3. RPMI...
查看详情从琼脂糖凝胶电泳中回收纯化DNA 片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统, 结合DNA 制备膜技术, 具有高效快速的特点。本试剂盒纯化DNA 片段纯度高,完整性好。可直接用于连接反应, PCR 扩增。 1. 将含有目的DNA片段的琼脂糖凝胶切下,并放入2.0 ml离心管中。 2. 按1:3的比例(凝胶质量毫克数:融胶液体积微升数)加入Extraction ...
查看详情加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。 1. 在所需量的CTAB抽提液中加入2-巯基乙醇,使终浓度达2%。将此溶液及CTAB溶液加热至65℃。 2. 用液氮(-196℃)或干冰(-78℃)冷却粉碎器/匀浆器,将植物组织粉碎成为细粉。 3. 将冷冻的组织转移到一个...
查看详情从琼脂糖凝胶电泳中回收纯化DNA 片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统, 结合DNA 制备膜技术, 具有高效快速的特点。本试剂盒纯化DNA 片段纯度高,完整性好。可直接用于连接反应, PCR 扩增。 1. 将含有目的DNA片段的琼脂糖凝胶切下,并放入2.0 ml离心管中。 2. 按1:3的比例(凝胶质量毫克数:融胶液体积微升数)加入Extraction ...
查看详情放线菌素D(actinomycin D)是抗肿瘤类抗生素,其主要作用是通过与DNA 结合,阻断依赖DNA 的mRNA 的合成,从而阻碍蛋白质合成,抑制瘤细胞分裂,引起细胞凋亡。细胞凋亡时,其核染色质的DNA 出现缺口甚至断裂,致使染色质凝聚、边缘化甚至呈现DNA 碎片。利用与DNA 结合的荧光染料染色后,在荧光显微镜下即可观察到上述变化。Hoechst33258 为与A-T 结合的特异性DNA 染料,对活细胞和固定细胞均能染色。 ...
查看详情1. 染色:铁苏木精 2. 肉眼观察: 标本为心壁的一部分。 3. 低倍镜观察: 由于心肌纤维排列方向不一致,有纵、横、斜等切面,故要全面观察标本,熟悉各种切面的部位。心肌纤维呈不规则短圆柱状,有分枝且互相吻合成网为纵切面,呈圆形或循圆形的小块为横切面。 4. 高倍镜观察: 选择形态典型的心肌纤维纵切面观察,注意与骨骼肌...
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