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血液形态学观察实验

1. 染色:瑞特氏(Wright’s)法 刺破耳垂或指尖,取血一滴,置玻片上,用另一玻片以30度角将血液推成厚薄均匀之涂片。干燥后,用瑞特氏染液数滴加于涂片上,再加蒸馏水,然后水洗至粉红色,干后即可观察。瑞氏染液用美蓝和伊红混合配制而成,其中部分美蓝氧化成为天青。染色后,对碱性染料美蓝有亲和力的部位呈蓝色;对酸性染料伊红有亲和力者呈鲜红色;对天青有亲和力者呈紫红色;对酸性染科和碱性染科都没有较强亲和力者则着色轻微,呈淡红色或淡紫色。 ...

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透明软骨形态学观察实验

1. 染色:HE 2. 肉眼观察: 标本为气管横切面,其中有蓝色"C"字形的透明软骨。 3. 低倍镜观察: 找到染成蓝色的透明软骨,逐项观察如下结构: (1) 软骨膜:位于透明软骨表面(注意是在整个软骨组织的周围),由致密结缔组织构成,外层纤维较内层多。 (2)透明软骨组织:基质染成蓝色,但着色深浅不一,靠近软骨细胞的部...

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方案 23.12 脂肪细胞的原代培养

一、切除附睾脂肪垫 1. 在充有 70 % CO 2 和 30 % O 2 混合气体的塑料箱内麻醉大鼠(雄性 Sprague-Dawley 大鼠:145~170 g,CD 系(Charles RiverBreeding Laboratories)。 2. 用铡刀断头放血。 3. 将鼠体在 70 % ...

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疏松结缔组织形态学观察实验

1. 染色:乙醛复红 肉眼观察: 此种标本颜色深浅不一,可见许多染色较深的细丝。 2. 低倍镜观察: 纤维交叉成网,细胞散在于纤维之间。选择着色浅的部位,转高倍镜观察。 3. 高倍镜观察: 注意分辨两种纤维和两种细胞。 (1) 胶原纤维:数量多,染成粉红色。纤维粗大,有分支,在自然松弛状态下呈波...

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方案23.11 前列腺上皮

取出前列腺和处理标本(30 min),用胶原蛋白酶消化前列腺组织(1 h),收集单个细胞和小的细胞团(1 h)。接种细胞,培养至形成单层(7 d)。 1. 在无菌条件下,取出理想的前列腺叶,放入灭菌过的 60 mm Petri 培养皿(玻璃或塑料的,直径为 60 mm)。 2. 剪除前列腺叶的脂肪,然后称重。 3. 加入 2 ml 胶原蛋白酶(675 U/ml,用含有 100 U/ml 青霉素和 100 μg...

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变移上皮形态学观察实验

1. 染色:HE 2. 肉眼观察: 标本是收缩状态的膀胱,着紫蓝色的一侧是膀胱腔面的变移上皮。 3. 低倍镜观察: 变移上皮由多层细胞构成,各层细胞形态不一。上皮游离面与基底面基本平行,基膜不明显。 4. 高倍镜观察: 从深面向浅层观察各层细胞的形态。 (1) 基底层:为一层矮柱状细胞。 ...

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方案23.10 口腔角质形成细胞

一、原代培养 1. 取手术切除或早期活检组织,将组织放入转运培养液(Leibowitz L-15培养液,添加 100 μg/ml 庆大霉素、100 U/ml青霉素、100 μg/ml 链霉素和 1μg/ml两性霉素B),尽快送到实验室。 2. 将组织移入 100 mm 培养皿,用 P-PBSA (不含 Ca 2+ 和 Mg 2+ ...

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复层扁平上皮形态学观察实验

1. 染色:HE 2. 肉眼观察: 标本为食管横切面,管腔呈不规则形,靠近腔面呈紫蓝色的部位为复层扁平上皮。 3. 低倍镜观察: 在食管横切面上所观察到的是复层扁平上皮的垂直切面。可见复层鳞状上皮和下方的部分组织向管腔形成突起(实为立体结构下的纵形皱襞)。复层扁平上皮由多层细胞构成,各层细胞形状不一。上皮与深面结缔组织的交界起伏不平,两者之间隔以基膜。基膜呈均匀的粉红色。...

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哺乳动物中制备基因组DNA实验

1.  切下组织并立即剪成小块,置于液氮中冻结。 2.  将200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵和研杵研碎,或用锤子将其捣为细粉末,每100 mg 组织用1. 2 ml 消化缓冲液悬浮。 3.  500 g 离心细胞5 min,弃上请。贴壁生长细胞先用胰酶消化。 4.  细胞用1~10 ml 冰冷的PBS重悬,500 g 离心5 min,弃上清,重复1次。 5....

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方案19.4 消除微生物污染

通过冲洗单层培养物或通过离心重悬非贴壁细胞,以高浓度抗生素清洗培养物数次,然后将培养物传代,用加抗生素的培养基传三次,再用不加抗生素的培养基传三次,每次传代后都要检测是否污染。 一般的原则是应将污染的培养物丢弃,而不要试图去除污染,除非是至关重要必须保留的细胞系才考虑去除污染。在任何情况下,很难做到完全消除污染。特别是在酵母污染时,如果试图去除污染,可能导致产生更顽固的对抗抗生素的细胞。 1. 仔细收集污染培养液,如有可能,应测试该有机体...

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