1.  吸取浓度为2×10 7 细胞/ml 的细胞悬液10 μl，滴于多聚L-赖氨酸包被的载玻片上。置于加湿盒中，使细胞静置30 min。 2.  将玻片放入玻片架，浸于盛有4%PFA固定液的染色用玻璃盘中，室温固定 20 min。 3.  将玻片架移至另一盛有3×PBS的盘中，放置2 min（此步终止PFA固定作用）。 4.  将玻片架移至一...

这一方案科能是最常用的质粒制备方法，该法不仅相当决捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。 1.  往2 ml 烧瓶中加入500 ml ，含有适当抗生素的LB培养基，然后加入5 ml 过夜培养的。 2.  带有所需质粒的大肠杆菌培养物，再于37℃培养至饱和状态（OD 600 ≈4）。 3.  于4℃，6 000 g 离心10 min，用4 ml GTE。 ...

收集对数生长晚期的同源或异源细胞系的培养基，过滤，根据需要用新鲜培养基稀释。 离心、冻存、解冻、过滤，这些步骤都有助于避免从原培养瓶中携带细胞。如果克隆培养的细胞与条件细胞是同一种细胞，这个问题就轻一点。但是用不同细胞系或原代小鼠成纤维细胞作为条件细胞可能更有利于克隆培养。如果用这种方法建立细胞株，细胞的性质必须经过鉴定（见方案16. 10、方案 16. 11、方案 16. 12)，排除因条件培养基而引起的细胞交叉污染。 1. 条件细胞（...

从悬浮细胞培养物中吸取样品，细胞计数，接种适量的悬浮细胞至新培养瓶的新鲜培养基中，使细胞浓度与开始培养时一致。 1. 准备好超净台，将试剂及材料放于超净台上准备开始实验。 2. 仔细检査培养物有无污染或衰退迹象。这一步骤对于悬浮培养物来说比单层贴壁细胞更难，细胞状态不好时表现为皱缩，外形不规则和（或）颗粒化。 健康的细胞干净而透明，在相差显微镜下核清晰可见，而且静置培养时常常可见小细胞团。 ...

在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。 1. 让悬液中大的组织团块沉降。 2. 把 9 ml 的细胞悬液（细胞团尽量少）加在6 ml 的Ficoll （Ficoll/metrizoate 调至 1.077g/ml）泛酸溶液上面，此步骤应在广口、透明有盖的离心管中进行，如 25 ml 无菌离心管或Nunclon普通容...

一、实验步骤 1.  接种一个单菌落于5 ml 培养基中，于37℃培养至饱和状态。 2.  取1. 5 ml 菌液离心20 s 加入300 μl 200 μg 溶菌酶的STET溶液，在旋涡混合器 上振荡混匀，冰上放置30 s~10 min。 3.  将管放入沸水中（100℃）1~2 min 离心15~30 min，吸出上清移入一个新的微量离心管中。 ...

羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以检验胎儿核型。 1.  抽取羊水 无菌抽取羊水10～20 ml，立即注入无菌离心管中； 2.  离心分离 1000 转/分，离心10 分钟，去上清，留0.5 ml； 3.  培养 加培养液4 ml（含小牛血清1 ml），用NaHCO 3...

与医院人员协商，提供已标记的装有培养基的容器，安排好从手术室或病理医生处取样品。 1. 提供含收集培养基的容器，标注明确，送进手术准备室或病理实验室。 2. 做好准备，随时取材。 3. 手术后装入收集容器，或派人收集后迅速送达，并告知确切的切取时间。 4.将样本送入培养室，样本应包裹三层（由内向外为：密封管、密封的塑料袋与内衬纱布垫的袋子，上面标明姓名、地址及电话号码，带防漏盖子、装...

1. 将30 mm × 500 mm 的五个透析袋煮沸，换三次蒸馏水。 2. 将透析袋转移到 Hanks’s 的平衡盐溶液中（HBSS）（HBSS 储存于4°C），冷却。 3. 在每个透析袋的一端打两个结。 4. 每个透析袋装一半的血清（需要透析的血清）（20 ml )。 5. 压入空气后将透析袋的另一端也打上结，在血清和结之间留出大约一半管子的空间。 ...

收集血液，使其凝固，分离血清。通过孔径逐级减少的过滤器过滤血清。分瓶，包装，冷冻保存。一、收集 可以从屠宰场收集全血。应直接收集从动物体中流出的血液，收集后妥善放置再分开。或者，在兽医的指导下从活动物身上直接取血。如果选择后一种方法，并用同组动物连续取血，可得到重复性较好的血清，但量很少，花费却很大。如果操作非常仔细，可做到无菌收集。二、凝固 将血液放在密闭容器中，4°C过夜，可形成凝块，这被称作自然凝固血清，它比通过离心和脱纤维蛋白等物理方法分离血细胞要好，因为在形成凝块的过程中...