配制全成分培养基时，准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器，一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分，调整pH , 直接使用或放回冰箱。 用于密封的培养瓶，含空气、低浓度 HCO 3 — 、大气 CO 2 浓度和低缓冲力。 1. 将血清和谷氨酰胺解冻，置于超净工作台内。 2. 所...

检査配方设计：如果配方完全，在加完血清之后可直接使用；如果配方不全（例如，缺少谷氨酰胺），则加人相应的浓缩液。 用10X 浓缩液配制培养基是一种折中的好方法，其经济性和便捷性介于使用以干粉配制培养基和使用1X 工作液 之间。方案11. 8 的设计可与练习10相结合。 1. 检查培养基的配方，并决定需要添加何种添加剂，例如谷氨酰胺。 2. 将培养基放在超净台内，如果需要可加入其他补充物或添加剂。 ...

免疫细胞化学是在细胞化学技术的基础上，吸收免疫学的理论和技术发展起来的一项技术，其基本原理是用荧光素或酶等标记物或显色物标记特异性抗体，通过免疫学中的抗原抗体反应与细胞内的相应抗原结合，形成带有荧光素或显色物的抗原抗体复合物，因此可用荧光显微镜或普通光学显微镜观察到复合物的存在，达到检测细胞内抗原物质的目的。细胞免疫化学是一项综合性的技术，包括标本的准备（制备、储存、固定等）、染色方法以及结果的分析判断，非特异性染色的减轻、消除等。 一、标本制备 ...

不断地搅拌将干粉溶解，调整至终体积，检测 pH 和传导率，按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉 1. 在容器中加入1L 超纯水。 2. 将容器放到磁力搅拌器上，转速设定为20 r/min 左右。 3 . 打开 D-PBS 干粉的包装或取 10 个药片，慢慢地加人容器中边加入边搅拌。 4. 一直搅拌到干粉完全溶解。 5. 检测样品的 pH 和传导率...

1. 在瓶子上标明日期、容量和批号。 2. 经过过夜循环后的第二天早晨，从纯水器中放出约50 ml水，分别用相应的仪器测定传导率（或电阻）和总有机碳（TOC） 含量，记录在日记本上。 3 . 如果水的质量达到限定的标准（在25°C 时，水的电阻≥ 10 MΩ/cm，TOC≤10 μg/L)，就直接收集至标注好的瓶子内。 4. 灌至一定的体积，例如，如果用于稀释 10 倍浓缩培养基，就分装成 430...

荧光免疫染色法显示细胞骨架具有清晰优点，但操作过程较复杂；考马斯亮蓝染色 法简便易行，清晰度稍差，但如分化处理适当能提高清晰度。 1.  固定液准备 0.1 M 磷酸二氢钠（NaH 2 PO 4 ·2H 2 O） 14.0 ...

细胞骨架微管的主要成分主要为管蛋白（Tublin），用免疫荧光法能显出其清晰结构。 1.  细胞培养 用支持物细胞培养法，把细胞培养在小盖片上； 2.  漂洗 用镊子挟出小盖片，在温PBS中漂洗3 次，每次30 秒； 3.  固定 在室温中用PBS配的3 %甲醛液固定20 分钟； ...

1.  盖片培养细胞（70 %～80 %汇合），PBS洗3 次； 2.  2 %的甲醛/PBS 液（甲醛按37 %）固定3 分钟； 3.  0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次，每次10 分钟； 4.  PBS漂洗3 次； 5.  用罗丹明（Rodamine）标记的鬼笔环肽（Phalloidin）（1:10）室温中反应15 分钟； ...

1. 用清洁剂完全淸洗后，用水冲洗过滤装置，然后用去离子水冲洗，并晾干。 2. 在过滤器中插入滤板，然后将过滤膜放到滤板上，如果过滤膜是由多聚碳酸盐制成的，要弄湿以消除静电。 3. 将预过滤器（玻璃纤维和其他需要的物质）放在过滤器的顶端。 4 . 安装过滤器支架，不要完全拧紧（可以留一个螺圈）。 5. 过滤器的进口与出口均用铝箔封住。 6. 用消...

做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程，与一般组织切片法大体相似，其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后，这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物，比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上，不仅细胞生长效果好并可与细胞一起包埋切片，免除了很多麻烦。若利用其它材料不仅不利细胞生长，最大缺欠是在包埋前需把细胞从支持物上分离下来，增加了工作量。 一、透射观察法 ...