方案11.14 用大型串联式过滤器灭菌过滤
1. 安放好过滤架(保护滤器的夹子和夹子架(除非滤器架子有腿))。 2. 将出口与接受瓶(底部有出口的过滤接受容器)相连。 3. 将过滤器(如 90 mm 膜和可重复使用的过滤器支架,或一次性碟式过滤器或筒式过滤器)的出口放到合适的高度,使收集培养基的瓶子(培养基瓶,铝箔包裹,干热法灭菌)正好位于过滤器下方,瓶口可被钟罩盖住,并且当装满的时候可以很容易地将瓶子取出。如果需要,可先用一个无菌培养瓶进行调试,但最后不要用这个瓶...
查看详情1. 安放好过滤架(保护滤器的夹子和夹子架(除非滤器架子有腿))。 2. 将出口与接受瓶(底部有出口的过滤接受容器)相连。 3. 将过滤器(如 90 mm 膜和可重复使用的过滤器支架,或一次性碟式过滤器或筒式过滤器)的出口放到合适的高度,使收集培养基的瓶子(培养基瓶,铝箔包裹,干热法灭菌)正好位于过滤器下方,瓶口可被钟罩盖住,并且当装满的时候可以很容易地将瓶子取出。如果需要,可先用一个无菌培养瓶进行调试,但最后不要用这个瓶...
查看详情1. 将管(硅树脂管,与蠕动泵相配,接至滤器接口)与蠕动泵(最好有底部开关)相连。 2. 将上游端插入待过滤的培养基中。 3. 打开过滤器包装,与蠕动泵出口相连。 4. 将过滤器(带罩的串联式过滤器)夹在架子(固定滤器)的合适高度,使收集培养基的瓶子(有刻度的培养基瓶,铝箔包裹,干热法灭菌)正好位于过滤器的下方,瓶颈可被盖住,并且当装满的时候可以很容易地将瓶子取出。如果需要,可先用一个无菌培养瓶进...
查看详情1. 接种一个单菌落于5 ml 无菌LB培养液中,在37℃培养至饱和状态(OD 600 ≈4)。 2. 取1.5 ml 培荞液离心20 s 沉淀用100 μl 溶液重悬并于室温静置5 min。 3. 加入200 μl NsOH/SDS溶液,混匀。于冰上放置5 min。 4. 加入150 μl 乙酸钾溶液,在旋涡混合器上搌荡2 s,于冰上...
查看详情1. 擦洗罩子和包装材料。 2. 将注射器装满待灭菌的溶液。 3 . 打开收集容器的盖子。 4 . 打开过滤器的包装,将其与注射器的尖端相连,连接时用包装的下半部来同定灭菌过滤器。 5. 将溶液通过过滤器排到收集容器中,只谣轻轻用力。 6 . 盖好收集容器。 7. 弃去注射器和过滤器。 注意...
查看详情配制储存浓缩液并冷冻保存。需要的时候解冻、混合、无菌过滤、保存。 1. 将溶液解冻,确保所有溶质均溶解。 2 . 按正确的比例将各成分混合: (a) 氨基酸浓缩液 100 ml (b) 酪氨酸和色氨酸 200 ml (c) 维生素 10 ml (d) 葡萄糖 100 ml 3. 混合后过滤灭菌。 ...
查看详情刀豆球蛋白属凝集素:凝集素(Lectin)是一类可结合特定糖基的蛋白质。每个凝集素分子有两个以上的结合位点。癌细胞和转化细胞所需凝集素的浓度比正常细胞低,这可能与细胞表面凝集素受体分布有关;正常细胞分散,癌细胞较集中,结合性增强。 1. 细胞悬液制备 用pH7.4的磷酸缓冲液(PBS)制成每毫升含10×10 4 个细胞的悬 液; ...
查看详情用适量的超纯水将包装中的干粉全部溶解:将容器放到磁力搅拌器上,边搅拌边加干粉。当所有的成分完全溶解后,培养基应立即过滤不能放置,否则会产生沉淀或有微生物污染。当最后的成分(如,谷氨酰胺、NaHCO3或血清)加完后,最好调整pH 。 1. 在容器中加入适量的超纯水。 2. 放入磁力搅拌子。 3. 将容器放到磁力搅拌器上,设定转速为 200 r/min。 4. 打开干粉的包装,将干粉慢慢...
查看详情配制全成分培养基时,准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器,一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分,调整pH , 直接使用或放回冰箱。 用于开放式容器于 CO 2 温箱中培养,或在密闭的瓶中充了 CO 2 气体,CO 2 浓度为2 % ,HCO 3 ...
查看详情配制全成分培养基时,准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器,一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分,调整pH , 直接使用或放回冰箱。 用于开式容器于 CO 2 温箱中培养,或在密闭的瓶中充了 CO 2 气体,CO 2 浓度为 5 % ,高 HCO 3 ...
查看详情配制全成分培养基时,准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器,一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分,调整pH , 直接使用或放回冰箱。 用于密封的培养瓶,含空气、低浓度 HCO 3 — 、大气 CO 2 浓度和低缓冲力。 1. 将血清和谷氨酰胺解冻,置于超净工作台内。 2. 所...
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