方案11.8 用10× 浓缩液配制培养基-方案11.8 用10× 浓缩液配制培养基(用于密封的培养瓶
配制全成分培养基时,准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器,一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分,调整pH , 直接使用或放回冰箱。 用于密封的培养瓶,含空气、低浓度 HCO 3 — 、大气 CO 2 浓度和低缓冲力。 1. 将血清和谷氨酰胺解冻,置于超净工作台内。 2. 所...
查看详情配制全成分培养基时,准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器,一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分,调整pH , 直接使用或放回冰箱。 用于密封的培养瓶,含空气、低浓度 HCO 3 — 、大气 CO 2 浓度和低缓冲力。 1. 将血清和谷氨酰胺解冻,置于超净工作台内。 2. 所...
查看详情检査配方设计:如果配方完全,在加完血清之后可直接使用;如果配方不全(例如,缺少谷氨酰胺),则加人相应的浓缩液。 用10X 浓缩液配制培养基是一种折中的好方法,其经济性和便捷性介于使用以干粉配制培养基和使用1X 工作液 之间。方案11. 8 的设计可与练习10相结合。 1. 检查培养基的配方,并决定需要添加何种添加剂,例如谷氨酰胺。 2. 将培养基放在超净台内,如果需要可加入其他补充物或添加剂。 ...
查看详情免疫细胞化学是在细胞化学技术的基础上,吸收免疫学的理论和技术发展起来的一项技术,其基本原理是用荧光素或酶等标记物或显色物标记特异性抗体,通过免疫学中的抗原抗体反应与细胞内的相应抗原结合,形成带有荧光素或显色物的抗原抗体复合物,因此可用荧光显微镜或普通光学显微镜观察到复合物的存在,达到检测细胞内抗原物质的目的。细胞免疫化学是一项综合性的技术,包括标本的准备(制备、储存、固定等)、染色方法以及结果的分析判断,非特异性染色的减轻、消除等。 一、标本制备 ...
查看详情不断地搅拌将干粉溶解,调整至终体积,检测 pH 和传导率,按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉 1. 在容器中加入1L 超纯水。 2. 将容器放到磁力搅拌器上,转速设定为20 r/min 左右。 3 . 打开 D-PBS 干粉的包装或取 10 个药片,慢慢地加人容器中边加入边搅拌。 4. 一直搅拌到干粉完全溶解。 5. 检测样品的 pH 和传导率...
查看详情1. 在瓶子上标明日期、容量和批号。 2. 经过过夜循环后的第二天早晨,从纯水器中放出约50 ml水,分别用相应的仪器测定传导率(或电阻)和总有机碳(TOC) 含量,记录在日记本上。 3 . 如果水的质量达到限定的标准(在25°C 时,水的电阻≥ 10 MΩ/cm,TOC≤10 μg/L),就直接收集至标注好的瓶子内。 4. 灌至一定的体积,例如,如果用于稀释 10 倍浓缩培养基,就分装成 430...
查看详情荧光免疫染色法显示细胞骨架具有清晰优点,但操作过程较复杂;考马斯亮蓝染色 法简便易行,清晰度稍差,但如分化处理适当能提高清晰度。 1. 固定液准备 0.1 M 磷酸二氢钠(NaH 2 PO 4 ·2H 2 O) 14.0 ...
查看详情细胞骨架微管的主要成分主要为管蛋白(Tublin),用免疫荧光法能显出其清晰结构。 1. 细胞培养 用支持物细胞培养法,把细胞培养在小盖片上; 2. 漂洗 用镊子挟出小盖片,在温PBS中漂洗3 次,每次30 秒; 3. 固定 在室温中用PBS配的3 %甲醛液固定20 分钟; ...
查看详情1. 盖片培养细胞(70 %~80 %汇合),PBS洗3 次; 2. 2 %的甲醛/PBS 液(甲醛按37 %)固定3 分钟; 3. 0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次,每次10 分钟; 4. PBS漂洗3 次; 5. 用罗丹明(Rodamine)标记的鬼笔环肽(Phalloidin)(1:10)室温中反应15 分钟; ...
查看详情1. 用清洁剂完全淸洗后,用水冲洗过滤装置,然后用去离子水冲洗,并晾干。 2. 在过滤器中插入滤板,然后将过滤膜放到滤板上,如果过滤膜是由多聚碳酸盐制成的,要弄湿以消除静电。 3. 将预过滤器(玻璃纤维和其他需要的物质)放在过滤器的顶端。 4 . 安装过滤器支架,不要完全拧紧(可以留一个螺圈)。 5. 过滤器的进口与出口均用铝箔封住。 6. 用消...
查看详情做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程,与一般组织切片法大体相似,其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后,这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物,比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上,不仅细胞生长效果好并可与细胞一起包埋切片,免除了很多麻烦。若利用其它材料不仅不利细胞生长,最大缺欠是在包埋前需把细胞从支持物上分离下来,增加了工作量。 一、透射观察法 ...
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