方案27.14 报告基因:β-半乳糖苷酶的原位染色实验
一、材料 非消毒物品 1. D-PBSA 2. 底物:X-gal(nvitrogen),以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL,用多聚丙烯管-20℃ 避光保存,最长可达 6 个月 3. 固定液:1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛,均以 PBSA 液配制;将 85 mL 水、10 mL 的 10×D-PBSA、5 mL 福尔马林(37% 甲醛溶液)及 0.2 mL 戊...
查看详情一、材料 非消毒物品 1. D-PBSA 2. 底物:X-gal(nvitrogen),以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL,用多聚丙烯管-20℃ 避光保存,最长可达 6 个月 3. 固定液:1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛,均以 PBSA 液配制;将 85 mL 水、10 mL 的 10×D-PBSA、5 mL 福尔马林(37% 甲醛溶液)及 0.2 mL 戊...
查看详情吖啶橙(Acridine Oringe:AO)是一种常用荧光染料,用于直接染色观察活细胞或 固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色,快速、简便和有一定的特异性。 吖啶橙对活细胞毒性小,配成2×10 -4 ~1×10 -4 可用于直接染色观察法更好。 1. 用盖片单层培养细胞,从瓶中取出后速用温Hanks...
查看详情此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细 胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷犍破坏,嘌呤碱 脱掉,脱氧核糖的中的醛基游离;醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合 物。 本方法中酸的离解根重要,若温度过低、或酸度不够,醛基暴露不充分,染色会过 浅;反之,酸解过...
查看详情1. 37 ℃温BSS漂洗3 次,每次20 秒~1 分钟;中性福尔马林固定30 分钟; 2. 先用蒸馏水漂洗1 次;再用蒸馏水稀释的苏木精液(1/20)染10 分钟; 3. 自来水洗、置入1 %NaHCO 3 液中漂洗至蓝紫色; 4. 伊红水溶液中染30 秒~1 分钟; 5. ...
查看详情Giemsa 染色是最常用的方法之一,它简便、快速,适用于多种细胞和染色体染色。 1. 染液制备 (1)称Giemse粉0.5 g、甘油22 ml,在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合, 研磨至无颗粒; (2)再将剩余甘油混在一起;56 ℃保温2 小时后,加入33 ml纯甲醇,保存于棕色 瓶内。 ...
查看详情根据人们的经验,肿瘤细胞在体外不易培养,建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。 当肿瘤组织或细胞初代接种培养后,常出现以下几种情况: 1. 完全无细胞游出或移动; 2. 有细胞移动和游出,但无细胞增殖,细胞长时间处于停滞状态以致难以传代; 3. 有细胞增殖,传若干代后停止生长或衰退死亡; 4. 传数代后细胞增殖缓慢...
查看详情细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。 一、材料 无菌 1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持培养基(无血清或生长因子),含有 37KBq/ml(1uCi/ml)的 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷,74 GBq/mmol(2Ci/mmol) 4. D-PB...
查看详情把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用复合染料染色,根据各类白细胞形态特征予以分类计数,得出相对比值(百分率),经观察数量、形态和质量的变化,对疾病有辅助诊断意义。 临床意义 1. 增多 (1) 中性粒细胞:急性化脓感染,粒细胞白血病,急性出血,溶血,手术后,尿毒症,酸中毒,急性汞中毒,急性铅中毒等。 (2) 嗜酸性粒细胞:变态反应,寄生虫病,某些皮肤病,某些血液病,手术后,烧伤等...
查看详情神经组织主要由两种神经细胞(神经元)和神经胶质细胞组成。神经元为高度分化 的细胞,在组织发生晚期已失掉增殖能力,对生存条件要求高,只有在适宜情况下,如 接种在胶原底层上,或在加入神经生长因子(NGF)和胶质细胞因子时,才能生存,并 可能出现一定程度的分化现象,如长出突起等,但却难使之增殖;即使培养胚胎组织情 况也是如此。对神经细胞的培养待深入研究。 神经胶质...
查看详情心肌组织是最早利用的培养材料,Carrel曾长期培养过鸡胚心肌组织,至今心肌仍 不失为好的培养物。最常用的是鸡胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎儿心肌等都可应用。心 肌是比较容易培养和生长的组织,可应用多种方法进行培养,如悬滴培养、组织块培养 和消化培养法等,主要取心室肌培养,均能获得良好的生长效果。 1. 选新鲜受精鸡卵,置温箱中孵育(温箱中放有水槽,以维持箱内湿度);每日 ...
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