上皮细胞类培养实验-胃上皮细胞培养实验
胃癌为我国高发癌症之一,培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用 价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道,但培养人胃上皮 细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功,并建 成转化细胞系(Ges-1)。 培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于摸索到了适于胃上皮 细胞生长的条件,它们主要是 ...
查看详情胃癌为我国高发癌症之一,培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用 价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道,但培养人胃上皮 细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功,并建 成转化细胞系(Ges-1)。 培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于摸索到了适于胃上皮 细胞生长的条件,它们主要是 ...
查看详情乳腺主要由腺上皮组成,培养成功时可获纯上皮细胞培养物。乳腺材料易于获得, 既可培养正常乳腺,也可利用乳腺癌组织。乳腺组织不难培养,是很好的培养和研究对象。 一、讨论 1. 上皮细胞和间充质关系密切,已证明上皮细胞生长和分化因子来源于间充 质。 在体内,上皮细胞生长在由胶原组成的基膜上,基膜含有胶原蛋白、附着蛋白和氨 基多...
查看详情从豚鼠胰腺组织分离细胞,用纱布或尼龙网过滤细胞悬液,将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞,使呈团状的细胞分散。然后,将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。 材料 1. 无菌 (1)F12K 组织培养液:含有 20% 小牛血清(F12K-CS20) (2)HBSS (3)HBSS-DVC: 不含 Ca ...
查看详情经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。 一、材料 1. 无菌 (1)L-15 Leibovitz 培养液 (2)Ham F12 培养液或 WilliamE 培养液:80~100 ml,含有 0.2% 牛白蛋白(V 级,Sigma) 和 1 ug/ml 牛胰岛素 ...
查看详情用不同浓度的实验试剂将细胞处理24h 。经胰蛋白酶消化后,以低细胞密度接种,温育1~3 周,染色后(见彩图6a,e) 计集落数(图22.1)。 材料 无菌 生长液 D-PBSA 0.25%粗制胰蛋白酶 待测化合物配制成最大使用浓度的10倍,溶于无血清生长液中;检査试验溶液的pH 和渗透压,若需要的话,予以调整; ...
查看详情1. 按1:100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中,烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。 2. 于37℃,约300 r/min 剧烈揺动培养。 注意事项 1. 如果不揺动培养细胞,所用烧瓶的体积应比培养液体积大20倍以上。 ...
查看详情细胞悬液用碘化丙啶和二乙酰荧光素的混合液染色,用荧光显微镜或流式细胞仪检测。 材料 无菌 单细胞悬液 双醋酸荧光素,10ug/ml,溶于 HBSS 碘化丙啶,500ug/ml 非灭菌 荧光显微镜 滤光片 荧光素:激发 450/590 nm ,发射...
查看详情这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。 1. 肉汤制备 用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加 10%马血清; 2. 培养 每45 ml肉汤培养基加2.5×10 6 /ml细胞悬液5 ml;培养14 天后观察 ...
查看详情在用一般方法难以确定时,可做电镜检测。 1. 细胞培养 48~72 小时。 2. 接近汇合前,用0.05%~0.25%胰蛋白酶消化细胞5~10 分钟。 3. 用吸管轻轻吹打,制备成细胞悬液。 ...
查看详情荧光显微镜检查法,荧光染料用 Hoechst 33258,它是一种能与DNA 特异结合的荧 光染料。支原体内含有DNA,能着色,是现有检测法中最方便和最有效的一种。 1. 标本 盖片培养细胞汇合前从瓶中取出(如细胞已完全汇合,能影响对支原 体的观察); 2. 漂洗 将细胞盖片置于碟皿中,用不含酚红的Hanks液漂...
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