1.  在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液，并标上序号1、2、3。 2.  吸取5 μl 细菌培养液加入1号试管中振荡揺匀。 3.  接着从1号试管吸5 μl 稀释液加入 2号试管振荡摇匀。 4.  从2号试管吸5 μl 稀释液加入3号试管振荡摇匀，每次都使用新的吸头。 5.  从每个试管中分别取100 μl 菌液涂布于LB平皿上，并且做好...

血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。 用具及试剂：白细胞稀释液（0.38ml）试管一支，显微镜，盖玻片，血红蛋白吸管，小玻璃棒，小手巾，计数板。 1. 增加 (1) 生理性：初生儿，妊娠末期，分娩期，经期，饭后，剧烈运动后，冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。 (2) 病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症，尿毒症，严重烧伤，传染性单核细胞增多症，传染性淋巴细胞增多症，急性出...

用胶原蛋 A 酶 和 dispase 消化切碎的组织块，然后用山梨糖醇分离隐窝。 材料 无菌 1. HBSS/PSG: 添加 lOOU/ml 青霉素、3ug/ml 链霉素和 25ug/ml 庆大霉素的 HBSS。 2. 消化混合液：含有 150U/ml XI 型胶原酶、40ug/ml dispase 和 1% FBS，用 DMEM 配制。 3. 生长培养...

取出器官或组织，将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后，将组织放在位于气液界面的支持物上，如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养，根据需要更换培养液。 一、材料 无菌 1. 解剖器械 2. 含有或不含有血清的培养液（如 M199） 3. 非组织培养处理的滤膜培养皿（如 Costar Transwell 聚碳酸酯，#3423，Cor...

巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重 要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群，难以长 期生存，好的条件下仅能生活2~3 周，因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限 细胞系；大多来自小鼠，如P388D-1、J774A.1、RAW309、Cr.1 等，均已获恶性。培养 中的巨噬细胞仍保留着原有形态特点和吞噬异物功能，并易于传代和...

包括人在内的各种成纤维细胞都很容易培养，也是其它组织培养时的副产物，极易 获得。人的成纤维细胞不仅容易培养，而且生物性状稳定，很难发生转化，成为二倍体 细胞培养的主要对象，人的二倍体细胞系，主要为成纤维细胞。 为获取大量成纤维细胞 培养，以便冻存，用人或动物胚体为好；动物可用小鼠或鸡胚，去头和内脏，剪成小碎 块后，用胰蛋白酶消化法培养；如为人胚，可取皮肤培养。幼儿包...

在指数生长中期，用丝裂霉素C处理饲养层细胞，将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞，或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞，然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上（图24.1）。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆，而可侵入饲养层，并逐渐过渡生长。 一、材料 无菌 1. 饲养层细胞（如 3T3、STO、10T1/2 或 FHS74I...

毛细血管内皮细胞在形态上与心血管系统其它部位内皮细胞相似，但实验证明，在 生物学性状上却大不相同，不能相互代替，因此必须单独进行培养。毛细血管细小，结 构简单，内皮细胞外有较多的结缔组织，进行分离培养有很大困难。近年毛细血管培养 已获成功；材料取自血管丰富组织，利用人的小儿包皮、人脾脏、牛肾上腺、癌组织（如 卵巢癌）等均可。 一、材料 ...

肝实质由大量肝细胞和少量间质组成，人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养； 肝脏具有取材方便和易于生长的优点，能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整，有多 种功能并具有代谢活化致癌物的能力，适用做多种研究；我国已建有多个人肝癌细胞系。 一、初代组织块培养 肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏，先剥除被膜和血管等纤维成分，用刀 或剪刀把...

胃癌为我国高发癌症之一，培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用 价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道，但培养人胃上皮 细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功，并建 成转化细胞系（Ges-1）。 培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于摸索到了适于胃上皮 细胞生长的条件，它们主要是 ...