特殊细胞培养实验-加支持物培养法
加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物,进行培养的 方法。 待细胞贴附于支持物生长增殖后,可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从 瓶中抽出,能做各种技术处理,是研究工作中常用的方法之一。 各种对细胞无毒性的如 玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等,均可做支持物用。 1. 支持物制备 ...
查看详情加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物,进行培养的 方法。 待细胞贴附于支持物生长增殖后,可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从 瓶中抽出,能做各种技术处理,是研究工作中常用的方法之一。 各种对细胞无毒性的如 玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等,均可做支持物用。 1. 支持物制备 ...
查看详情以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养,每天计数细胞直至平台期。 材料 无菌 悬浮细胞培养 培养液,l00 ml D-PBSA(细胞计数用) 24 孔板 非无菌 装培养板的塑料盒 CO 2 温箱或 5% C0 ...
查看详情以三种不同的细胞浓度在多孔板中培养三组细胞,在达到平台期之前,每天计数一个板中的细胞。 材料 无菌 单层细胞培养:A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm 2 培养瓶,晚对数期 1 瓶 0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml 生长液,100 ml, 伴有 2...
查看详情开始一系列的培养,每天在一定的时间计数细胞直至它们到达平台期。 材料 无菌 单层细胞培养,A549,Vem 或 HeLa-S3, 75 cm 2 培养瓶,晚对数期 1 瓶 0.25% 粗制胰蛋白酶,混合有 lOmmol/L EDTA 5 ml 生长液,含 2 mmol/LNaHC0 ...
查看详情材料 无菌 细胞培养,如 1X10 4 ~ 1X10 6 个细胞,24 孔板 3 H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特异活性并不重要,因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定) 非无菌 ...
查看详情当前培养细胞既可可在国内相互寄赠,也可进行国际间的交流,为此要有运输细胞的方法。装运方法有两种:一是用液氮或干冰保存,效果较好,但需用特制容器如小液氮罐等,又因液氮和干冰蒸发均能较快,适于空运,比较麻烦;另为充液法,比较简便。 充液法,装运过程如下 1. 选生生状态良好的细胞,待达80%或90%汇合时,去掉旧培养液换入新培 养液,量要达到培养瓶的颈部(过满易污染),保留少许空间,塞紧瓶塞; ...
查看详情用3H -TdR 标记细胞,提取DNA用闪烁仪测定放射活性水平 材料 无菌 处于合适时期的细胞(若使用热的 2mol/L PCA 方法需要细胞生长于玻璃器皿或试管中,若用其他方法,细胞可培养于常规的塑料皿中) 3 H-TdR ,0.4 MBq /ml (约 10uC i/ml),每毫升培养液用 lOOul 提示 ...
查看详情溶解蛋白质,与染料混匀,l0min 后阅读 O.D.。 材料 十二烷基硫酸钠(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考马斯亮蓝 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%),溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷酸:将 100 mg 考马斯蓝溶于 50 ml 95% 乙醇,加人 100 ml 85% 磷酸;然后以 1L 水稀释。 蛋白...
查看详情在缓冲液中匀浆细胞或组织,继用超声处理。以一定量的细胞悬液与Hoechst33258混匀,测定其荧光。 材料 非无菌: 缓冲液:0.05mol/LNaPO4;2.0mol/L NaCl,pH7.4 , 含 2 X l0 -3 mol/L EDTA 。 Hoechst33258;缓冲液中,100ng/ml 以上的 DNA 用 lug/ml,10~100ng...
查看详情目的 制备复杂溶液及热不稳定试荆和培养钱的灭曲 训练目标 过滤的技术和容址的正确选择。比较正压和负珠过滤,监督:指导培养幕的制备。在过滤的初始阶段连续监督,在过滤过程中间歇监份,在抽样质量控制时连续监督。 时间:2h。 背景信息 以干粉配制培养地储液(见方案11.9).过滤灭菌(见11.5.2节.方案11.12);可供选择的...
查看详情