以三种不同的细胞浓度在多孔板中培养三组细胞，在达到平台期之前，每天计数一个板中的细胞。 材料 无菌 单层细胞培养：A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm 2 培养瓶，晚对数期 1 瓶 0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml 生长液，100 ml, 伴有 2...

开始一系列的培养，每天在一定的时间计数细胞直至它们到达平台期。 材料 无菌 单层细胞培养，A549,Vem 或 HeLa-S3, 75 cm 2 培养瓶，晚对数期 1 瓶 0.25% 粗制胰蛋白酶，混合有 lOmmol/L EDTA 5 ml 生长液，含 2 mmol/LNaHC0 ...

材料 无菌 细胞培养，如 1X10 4 ～ 1X10 6 个细胞，24 孔板 3 H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定） 非无菌 ...

当前培养细胞既可可在国内相互寄赠，也可进行国际间的交流，为此要有运输细胞的方法。装运方法有两种：一是用液氮或干冰保存，效果较好，但需用特制容器如小液氮罐等，又因液氮和干冰蒸发均能较快，适于空运，比较麻烦；另为充液法，比较简便。 充液法，装运过程如下 1.  选生生状态良好的细胞，待达80%或90%汇合时，去掉旧培养液换入新培 养液，量要达到培养瓶的颈部（过满易污染），保留少许空间，塞紧瓶塞； ...

用3H -TdR 标记细胞，提取DNA用闪烁仪测定放射活性水平 材料 无菌 处于合适时期的细胞（若使用热的 2mol/L PCA 方法需要细胞生长于玻璃器皿或试管中，若用其他方法，细胞可培养于常规的塑料皿中） 3 H-TdR ，0.4 MBq /ml (约 10uC i/ml)，每毫升培养液用 lOOul 提示 ...

溶解蛋白质，与染料混匀，l0min 后阅读 O.D.。 材料 十二烷基硫酸钠（SLS,SDS)，水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考马斯亮蓝 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%)，溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷酸：将 100 mg 考马斯蓝溶于 50 ml 95% 乙醇，加人 100 ml 85% 磷酸；然后以 1L 水稀释。 蛋白...

在缓冲液中匀浆细胞或组织，继用超声处理。以一定量的细胞悬液与Hoechst33258混匀，测定其荧光。 材料 非无菌： 缓冲液：0.05mol/LNaPO4；2.0mol/L NaCl，pH7.4 , 含 2 X l0 -3 mol/L EDTA 。 Hoechst33258；缓冲液中，100ng/ml 以上的 DNA 用 lug/ml,10~100ng...

目的 制备复杂溶液及热不稳定试荆和培养钱的灭曲 训练目标 过滤的技术和容址的正确选择。比较正压和负珠过滤，监督：指导培养幕的制备。在过滤的初始阶段连续监督，在过滤过程中间歇监份，在抽样质量控制时连续监督。 时间：2h。 背景信息 以干粉配制培养地储液（见方案11.9)．过滤灭菌（见11.5.2节．方案11.12);可供选择的...

目的 制备一系列色阶，与实验室通常使用的比色卡很相似，含有简单的培养基或带酚红的盐溶液，调节其pH范围使之包含培养中常见的pH范围。 应用 在制备培养墓以及换液或传代前川于参照估计pH。 训练目标 熟悉酚红作为pH指示剂的使用．用注射式过渡器灭菌。 监督：开始时连续监督，在之后直到操作完成，可以减少监督。 ...

目的 在常压下使用的等渗盐溶液的制备。 应用 用于稀释浓缩液．如稀释2.5％腆蛋白酶；胰蛋自酶消化前的预漂洗，收集细胞或换试剂时的清洗溶液。因为它不含Can+和Mg汁，NaHCO3或葡萄糖，所以不适合长时间孵育。 训练目标 简单盐溶液的构成。渗透压．缓冲液和pH控制。利用高压灭菌锅消毒热稳定溶液。 监督：...