本法为固定染色法，简便易行，标本可长期保存，不仅适于检测支原体，亦可用于检测真菌和细菌。 1.  取材 用支持物盖片培养法或培养液均可；用培养液时，先吸取培养液1 毫升， 500～800 转/分，离心5 分钟后去上清，余0.2 ml备用。 2.  低涨处理 用新鲜配制的0.5 %的枸橼酸溶液，处理盖片细胞或加入到1项0.2 ml ...

1.  标本制备 用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物（长形盖片；24 小 时前置入），令细胞面向上，置放在载物片上，再覆以24 mmX 36 mm的较大 盖片；如不用支持物培养法，也可取少许培养液滴在载物片上，再覆以盖片 法观察亦可。 2.  观察 相差显微镜油浸下观察，支原体呈暗色微小颗粒，有类似布朗运动的...

萘黑、台盼蓝以及很多其他染料[KahenbachetaL1958]均不能透过活细胞。 将细胞悬液与染料混匀，在低倍显微镜下检査。 材料 无菌 受试细胞，如胰蛋白酶消化的贴壁细胞、融化冷冻的细胞或原代离散的细胞 合适的生长液 20ml 0.25% 胰蛋白酶 5ml D-PBSA10ml 非灭菌 ...

细胞培养至适当密度，用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min，清洗后固定细胞，除去未掺入的前体物，准备同位素放射自显术。 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷，2.0MBq/ml (约 50uCi/ml)，75 GBq...

快速复苏细胞，缓慢稀释，以高细胞密度重新接种（图20.9）。 材料 无菌 培养瓶（如果需要离心时） 生长培养基 吸量管，1ml，10ml 注射器和19号针头（如果你使用玻璃冻存管） 非灭菌 保护性手套和面罩 37℃无菌水，10cm深...

1.  取5 ml 液体培养基加入一支无菌的16 mm 或18 mm 的培养试管中。 2.  用接种环挑一个单菌落，浸没于培养液中并轻轻振动接种环，使待接种的细菌分散在培养液中。 3.  盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min 速度。 4.  于37 ℃培养至饱和（约6 h）新鲜培养至饱和期的培养液细菌浓度大约为1X10 9 ...

悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型， 则无须做任何处理，在传代时先做离心处理去除旧培养液，添加新培养液即可。但在培 养贴附型细胞时，因其有贴附性，必须进行干扰使细胞不能贴附，才能形成悬浮状态生 长的细胞。 1.  用大培养瓶增加含有铁芯的无毒的聚苯乙烯棒，在培养 中进行电磁搅拌，使细胞不能贴壁而成悬浮培养，为此必须拥有能容纳电磁搅...

大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质，如细胞长成片之后， 让细胞片与底物脱离，更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时，则细胞片能卷聚成 球体形，成为球体培养。 球体细胞也可和单层细胞混合培养，便于研究两种不同细胞的相互影响。方法是 1.  先做单层培养，待细胞长成单层细胞后，把2 %琼脂培养液注入瓶内，令其在单层细胞 上面...

加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物，进行培养的 方法。 待细胞贴附于支持物生长增殖后，可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从 瓶中抽出，能做各种技术处理，是研究工作中常用的方法之一。 各种对细胞无毒性的如 玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等，均可做支持物用。 1.  支持物制备 ...

以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。 材料 无菌 悬浮细胞培养 培养液，l00 ml D-PBSA(细胞计数用） 24 孔板 非无菌 装培养板的塑料盒 CO 2 温箱或 5% C0 ...