乳腺主要由腺上皮组成，培养成功时可获纯上皮细胞培养物。乳腺材料易于获得， 既可培养正常乳腺，也可利用乳腺癌组织。乳腺组织不难培养，是很好的培养和研究对象。 一、讨论 1.  上皮细胞和间充质关系密切，已证明上皮细胞生长和分化因子来源于间充 质。 在体内，上皮细胞生长在由胶原组成的基膜上，基膜含有胶原蛋白、附着蛋白和氨 基多...

从豚鼠胰腺组织分离细胞，用纱布或尼龙网过滤细胞悬液，将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞，使呈团状的细胞分散。然后，将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。 材料 1. 无菌 （1）F12K 组织培养液：含有 20% 小牛血清（F12K-CS20) ​（2）HBSS （3）HBSS-DVC: 不含 Ca ...

经肝门静脉或肝门静脉分支插管，用无钙缓冲液灌洗肝 15 min，再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞，计数有活力的肝细胞。 一、材料 1. 无菌 （1）L-15 Leibovitz 培养液 （2）Ham F12 培养液或 WilliamE 培养液：80～100 ml，含有 0.2% 牛白蛋白（V 级，Sigma) 和 1 ug/ml 牛胰岛素 ...

用不同浓度的实验试剂将细胞处理24h 。经胰蛋白酶消化后，以低细胞密度接种，温育1～3 周，染色后（见彩图6a,e) 计集落数（图22.1)。 材料 无菌 生长液 D-PBSA 0.25%粗制胰蛋白酶 待测化合物配制成最大使用浓度的10倍，溶于无血清生长液中；检査试验溶液的pH 和渗透压，若需要的话，予以调整； ...

1.  按1：100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中，烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。 2.  于37℃，约300 r/min 剧烈揺动培养。 注意事项 1.  如果不揺动培养细胞，所用烧瓶的体积应比培养液体积大20倍以上。 ...

细胞悬液用碘化丙啶和二乙酰荧光素的混合液染色，用荧光显微镜或流式细胞仪检测。 材料 无菌 单细胞悬液 双醋酸荧光素，10ug/ml，溶于 HBSS 碘化丙啶，500ug/ml 非灭菌 荧光显微镜 滤光片 荧光素：激发 450/590 nm ，发射...

这是用支原体培养基方法进行检测，培养法稍显繁锁，但比较精确。 1.  肉汤制备 用支原体肉汤（Sigma 产）和北京生物制品所制两种均可；用前加 10%马血清； 2.  培养 每45 ml肉汤培养基加2.5×10 6 /ml细胞悬液5 ml；培养14 天后观察 ...

在用一般方法难以确定时，可做电镜检测。 1.  细胞培养 48～72 小时。 2.  接近汇合前，用0.05%～0.25%胰蛋白酶消化细胞5～10 分钟。 3.  用吸管轻轻吹打，制备成细胞悬液。 ...

荧光显微镜检查法，荧光染料用 Hoechst 33258，它是一种能与DNA 特异结合的荧 光染料。支原体内含有DNA，能着色，是现有检测法中最方便和最有效的一种。 1.  标本 盖片培养细胞汇合前从瓶中取出（如细胞已完全汇合，能影响对支原 体的观察）； 2.  漂洗 将细胞盖片置于碟皿中，用不含酚红的Hanks液漂...

本法为固定染色法，简便易行，标本可长期保存，不仅适于检测支原体，亦可用于检测真菌和细菌。 1.  取材 用支持物盖片培养法或培养液均可；用培养液时，先吸取培养液1 毫升， 500～800 转/分，离心5 分钟后去上清，余0.2 ml备用。 2.  低涨处理 用新鲜配制的0.5 %的枸橼酸溶液，处理盖片细胞或加入到1项0.2 ml ...