上皮细胞类培养实验-毛细血管内皮细胞培养实验
毛细血管内皮细胞在形态上与心血管系统其它部位内皮细胞相似,但实验证明,在 生物学性状上却大不相同,不能相互代替,因此必须单独进行培养。毛细血管细小,结 构简单,内皮细胞外有较多的结缔组织,进行分离培养有很大困难。近年毛细血管培养 已获成功;材料取自血管丰富组织,利用人的小儿包皮、人脾脏、牛肾上腺、癌组织(如 卵巢癌)等均可。 一、材料 ...
查看详情毛细血管内皮细胞在形态上与心血管系统其它部位内皮细胞相似,但实验证明,在 生物学性状上却大不相同,不能相互代替,因此必须单独进行培养。毛细血管细小,结 构简单,内皮细胞外有较多的结缔组织,进行分离培养有很大困难。近年毛细血管培养 已获成功;材料取自血管丰富组织,利用人的小儿包皮、人脾脏、牛肾上腺、癌组织(如 卵巢癌)等均可。 一、材料 ...
查看详情肝实质由大量肝细胞和少量间质组成,人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养; 肝脏具有取材方便和易于生长的优点,能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整,有多 种功能并具有代谢活化致癌物的能力,适用做多种研究;我国已建有多个人肝癌细胞系。 一、初代组织块培养 肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏,先剥除被膜和血管等纤维成分,用刀 或剪刀把...
查看详情胃癌为我国高发癌症之一,培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用 价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道,但培养人胃上皮 细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功,并建 成转化细胞系(Ges-1)。 培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于摸索到了适于胃上皮 细胞生长的条件,它们主要是 ...
查看详情乳腺主要由腺上皮组成,培养成功时可获纯上皮细胞培养物。乳腺材料易于获得, 既可培养正常乳腺,也可利用乳腺癌组织。乳腺组织不难培养,是很好的培养和研究对象。 一、讨论 1. 上皮细胞和间充质关系密切,已证明上皮细胞生长和分化因子来源于间充 质。 在体内,上皮细胞生长在由胶原组成的基膜上,基膜含有胶原蛋白、附着蛋白和氨 基多...
查看详情从豚鼠胰腺组织分离细胞,用纱布或尼龙网过滤细胞悬液,将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞,使呈团状的细胞分散。然后,将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。 材料 1. 无菌 (1)F12K 组织培养液:含有 20% 小牛血清(F12K-CS20) (2)HBSS (3)HBSS-DVC: 不含 Ca ...
查看详情经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。 一、材料 1. 无菌 (1)L-15 Leibovitz 培养液 (2)Ham F12 培养液或 WilliamE 培养液:80~100 ml,含有 0.2% 牛白蛋白(V 级,Sigma) 和 1 ug/ml 牛胰岛素 ...
查看详情用不同浓度的实验试剂将细胞处理24h 。经胰蛋白酶消化后,以低细胞密度接种,温育1~3 周,染色后(见彩图6a,e) 计集落数(图22.1)。 材料 无菌 生长液 D-PBSA 0.25%粗制胰蛋白酶 待测化合物配制成最大使用浓度的10倍,溶于无血清生长液中;检査试验溶液的pH 和渗透压,若需要的话,予以调整; ...
查看详情1. 按1:100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中,烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。 2. 于37℃,约300 r/min 剧烈揺动培养。 注意事项 1. 如果不揺动培养细胞,所用烧瓶的体积应比培养液体积大20倍以上。 ...
查看详情细胞悬液用碘化丙啶和二乙酰荧光素的混合液染色,用荧光显微镜或流式细胞仪检测。 材料 无菌 单细胞悬液 双醋酸荧光素,10ug/ml,溶于 HBSS 碘化丙啶,500ug/ml 非灭菌 荧光显微镜 滤光片 荧光素:激发 450/590 nm ,发射...
查看详情这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。 1. 肉汤制备 用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加 10%马血清; 2. 培养 每45 ml肉汤培养基加2.5×10 6 /ml细胞悬液5 ml;培养14 天后观察 ...
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