做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程，与一般组织切片法大体相似，其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后，这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物，比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上，不仅细胞生长效果好并可与细胞一起包埋切片，免除了很多麻烦。若利用其它材料不仅不利细胞生长，最大缺欠是在包埋前需把细胞从支持物上分离下来，增加了工作量。 一、透射观察法 ...

一、材料 非消毒物品 1. D-PBSA 2. 底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL，用多聚丙烯管-20℃ 避光保存，最长可达 6 个月 3. 固定液：1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛，均以 PBSA 液配制；将 85 mL 水、10 mL 的 10×D-PBSA、5 mL 福尔马林（37% 甲醛溶液）及 0.2 mL 戊...

吖啶橙（Acridine Oringe：AO）是一种常用荧光染料，用于直接染色观察活细胞或 固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色，快速、简便和有一定的特异性。 吖啶橙对活细胞毒性小，配成2×10 －4 ～1×10 －4 可用于直接染色观察法更好。 1.  用盖片单层培养细胞，从瓶中取出后速用温Hanks...

此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细 胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸，使嘌呤碱基与糖苷犍破坏，嘌呤碱 脱掉，脱氧核糖的中的醛基游离；醛基能与Schiff试剂相结合，形成一种紫色的复合 物。 本方法中酸的离解根重要，若温度过低、或酸度不够，醛基暴露不充分，染色会过 浅；反之，酸解过...

1.  37 ℃温BSS漂洗3 次，每次20 秒~1 分钟；中性福尔马林固定30 分钟； 2.  先用蒸馏水漂洗1 次；再用蒸馏水稀释的苏木精液（1/20）染10 分钟； 3.  自来水洗、置入1 %NaHCO 3 液中漂洗至蓝紫色； 4.  伊红水溶液中染30 秒~1 分钟； 5.  ...

Giemsa 染色是最常用的方法之一，它简便、快速，适用于多种细胞和染色体染色。 1.  染液制备 （1）称Giemse粉0.5 g、甘油22 ml，在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合， 研磨至无颗粒； （2）再将剩余甘油混在一起；56 ℃保温2 小时后，加入33 ml纯甲醇，保存于棕色 瓶内。 ...

根据人们的经验，肿瘤细胞在体外不易培养，建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。 当肿瘤组织或细胞初代接种培养后，常出现以下几种情况： 1.  完全无细胞游出或移动； 2.  有细胞移动和游出，但无细胞增殖，细胞长时间处于停滞状态以致难以传代； 3.  有细胞增殖，传若干代后停止生长或衰退死亡； 4.  传数代后细胞增殖缓慢...

细胞在无限制培养基中培养，生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。 一、材料 无菌 1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持培养基（无血清或生长因子），含有 37KBq/ml（1uCi/ml）的 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷，74 GBq/mmol(2Ci/mmol） 4. D-PB...

把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料染色，根据各类白细胞形态特征予以分类计数，得出相对比值（百分率），经观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。 临床意义 1. 增多 (1) 中性粒细胞：急性化脓感染，粒细胞白血病，急性出血，溶血，手术后，尿毒症，酸中毒，急性汞中毒，急性铅中毒等。 (2) 嗜酸性粒细胞：变态反应，寄生虫病，某些皮肤病，某些血液病，手术后，烧伤等...

神经组织主要由两种神经细胞（神经元）和神经胶质细胞组成。神经元为高度分化 的细胞，在组织发生晚期已失掉增殖能力，对生存条件要求高，只有在适宜情况下，如 接种在胶原底层上，或在加入神经生长因子（NGF）和胶质细胞因子时，才能生存，并 可能出现一定程度的分化现象，如长出突起等，但却难使之增殖；即使培养胚胎组织情 况也是如此。对神经细胞的培养待深入研究。 神经胶质...