文章资讯

肌组织细胞培养实验-骨骼肌细胞培养实验

动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠 (Wistar 大鼠更好)。 1.  杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块; 2.  用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过, 合成培养基加10 %小牛(或马)血清培养,为促进分分蘖节经可加1 %的胎汁; ...

查看详情

微生物固体培养实验-连续稀释法

1.  在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液,并标上序号1、2、3。 2.  吸取5 μl 细菌培养液加入1号试管中振荡揺匀。 3.  接着从1号试管吸5 μl 稀释液加入 2号试管振荡摇匀。 4.  从2号试管吸5 μl 稀释液加入3号试管振荡摇匀,每次都使用新的吸头。 5.  从每个试管中分别取100 μl 菌液涂布于LB平皿上,并且做好...

查看详情

白细胞计数实验

血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。 用具及试剂:白细胞稀释液(0.38ml)试管一支,显微镜,盖玻片,血红蛋白吸管,小玻璃棒,小手巾,计数板。 1. 增加 (1) 生理性:初生儿,妊娠末期,分娩期,经期,饭后,剧烈运动后,冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。 (2) 病理性:大部分化脓性细菌所引起的炎症,尿毒症,严重烧伤,传染性单核细胞增多症,传染性淋巴细胞增多症,急性出...

查看详情

方案23.5 结肠隐窝的分离和培养实验

用胶原蛋 A 酶 和 dispase 消化切碎的组织块,然后用山梨糖醇分离隐窝。 材料 无菌 1. HBSS/PSG: 添加 lOOU/ml 青霉素、3ug/ml 链霉素和 25ug/ml 庆大霉素的 HBSS。 2. 消化混合液:含有 150U/ml XI 型胶原酶、40ug/ml dispase 和 1% FBS,用 DMEM 配制。 3. 生长培养...

查看详情

方案25.1 器官培养实验

取出器官或组织,将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后,将组织放在位于气液界面的支持物上,如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养,根据需要更换培养液。 一、材料 无菌 1. 解剖器械 2. 含有或不含有血清的培养液(如 M199) 3. 非组织培养处理的滤膜培养皿(如 Costar Transwell 聚碳酸酯,#3423,Cor...

查看详情

结缔组织类细胞培养实验-巨噬细胞培养实验

巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重 要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群,难以长 期生存,好的条件下仅能生活2~3 周,因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限 细胞系;大多来自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW309、Cr.1 等,均已获恶性。培养 中的巨噬细胞仍保留着原有形态特点和吞噬异物功能,并易于传代和...

查看详情

结缔组织类细胞培养实验-成纤维细胞培养实验

包括人在内的各种成纤维细胞都很容易培养,也是其它组织培养时的副产物,极易 获得。人的成纤维细胞不仅容易培养,而且生物性状稳定,很难发生转化,成为二倍体 细胞培养的主要对象,人的二倍体细胞系,主要为成纤维细胞。 为获取大量成纤维细胞 培养,以便冻存,用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎 块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包...

查看详情

方案 24.1 原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验

在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆,而可侵入饲养层,并逐渐过渡生长。 一、材料 无菌 1. 饲养层细胞(如 3T3、STO、10T1/2 或 FHS74I...

查看详情

上皮细胞类培养实验-毛细血管内皮细胞培养实验

毛细血管内皮细胞在形态上与心血管系统其它部位内皮细胞相似,但实验证明,在 生物学性状上却大不相同,不能相互代替,因此必须单独进行培养。毛细血管细小,结 构简单,内皮细胞外有较多的结缔组织,进行分离培养有很大困难。近年毛细血管培养 已获成功;材料取自血管丰富组织,利用人的小儿包皮、人脾脏、牛肾上腺、癌组织(如 卵巢癌)等均可。 一、材料 ...

查看详情

上皮细胞类培养实验-肝细胞培养实验

肝实质由大量肝细胞和少量间质组成,人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养; 肝脏具有取材方便和易于生长的优点,能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整,有多 种功能并具有代谢活化致癌物的能力,适用做多种研究;我国已建有多个人肝癌细胞系。 一、初代组织块培养 肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏,先剥除被膜和血管等纤维成分,用刀 或剪刀把...

查看详情