肌组织细胞培养实验-骨骼肌细胞培养实验
动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠 (Wistar 大鼠更好)。 1. 杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块; 2. 用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过, 合成培养基加10 %小牛(或马)血清培养,为促进分分蘖节经可加1 %的胎汁; ...
查看详情动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠 (Wistar 大鼠更好)。 1. 杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块; 2. 用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过, 合成培养基加10 %小牛(或马)血清培养,为促进分分蘖节经可加1 %的胎汁; ...
查看详情1. 在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液,并标上序号1、2、3。 2. 吸取5 μl 细菌培养液加入1号试管中振荡揺匀。 3. 接着从1号试管吸5 μl 稀释液加入 2号试管振荡摇匀。 4. 从2号试管吸5 μl 稀释液加入3号试管振荡摇匀,每次都使用新的吸头。 5. 从每个试管中分别取100 μl 菌液涂布于LB平皿上,并且做好...
查看详情血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞。 用具及试剂:白细胞稀释液(0.38ml)试管一支,显微镜,盖玻片,血红蛋白吸管,小玻璃棒,小手巾,计数板。 1. 增加 (1) 生理性:初生儿,妊娠末期,分娩期,经期,饭后,剧烈运动后,冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。 (2) 病理性:大部分化脓性细菌所引起的炎症,尿毒症,严重烧伤,传染性单核细胞增多症,传染性淋巴细胞增多症,急性出...
查看详情用胶原蛋 A 酶 和 dispase 消化切碎的组织块,然后用山梨糖醇分离隐窝。 材料 无菌 1. HBSS/PSG: 添加 lOOU/ml 青霉素、3ug/ml 链霉素和 25ug/ml 庆大霉素的 HBSS。 2. 消化混合液:含有 150U/ml XI 型胶原酶、40ug/ml dispase 和 1% FBS,用 DMEM 配制。 3. 生长培养...
查看详情取出器官或组织,将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后,将组织放在位于气液界面的支持物上,如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养,根据需要更换培养液。 一、材料 无菌 1. 解剖器械 2. 含有或不含有血清的培养液(如 M199) 3. 非组织培养处理的滤膜培养皿(如 Costar Transwell 聚碳酸酯,#3423,Cor...
查看详情巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重 要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群,难以长 期生存,好的条件下仅能生活2~3 周,因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限 细胞系;大多来自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW309、Cr.1 等,均已获恶性。培养 中的巨噬细胞仍保留着原有形态特点和吞噬异物功能,并易于传代和...
查看详情包括人在内的各种成纤维细胞都很容易培养,也是其它组织培养时的副产物,极易 获得。人的成纤维细胞不仅容易培养,而且生物性状稳定,很难发生转化,成为二倍体 细胞培养的主要对象,人的二倍体细胞系,主要为成纤维细胞。 为获取大量成纤维细胞 培养,以便冻存,用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎 块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包...
查看详情在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆,而可侵入饲养层,并逐渐过渡生长。 一、材料 无菌 1. 饲养层细胞(如 3T3、STO、10T1/2 或 FHS74I...
查看详情毛细血管内皮细胞在形态上与心血管系统其它部位内皮细胞相似,但实验证明,在 生物学性状上却大不相同,不能相互代替,因此必须单独进行培养。毛细血管细小,结 构简单,内皮细胞外有较多的结缔组织,进行分离培养有很大困难。近年毛细血管培养 已获成功;材料取自血管丰富组织,利用人的小儿包皮、人脾脏、牛肾上腺、癌组织(如 卵巢癌)等均可。 一、材料 ...
查看详情肝实质由大量肝细胞和少量间质组成,人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养; 肝脏具有取材方便和易于生长的优点,能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整,有多 种功能并具有代谢活化致癌物的能力,适用做多种研究;我国已建有多个人肝癌细胞系。 一、初代组织块培养 肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏,先剥除被膜和血管等纤维成分,用刀 或剪刀把...
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