1. 参照 ABI 的操作步骤，为待扩增样品准备足量的混合物，每个样品管包含： (a) AMPF/STR ® PCR 反应混合物 21 μl (b) AMPF/STR ® SGM Plus ® 引物一套 11 μl (c) Amplitaq gold ...

1.  将来自一个单菌落的过夜培荞新鲜菌液按1 ：50稀释，在含有适当抗生素的2×YT培养液（1~5 ml）中，于37℃培养至OD 600 =0.1。 2.  按1，10，20，50 MOI感染细胞，于37℃剧烈振荡下培养4.5 h。 3.  4 000 g 离心10 min，收集上请液并于65℃加热灭活15 min。 4....

收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20 min 后，冲洗凝胶，干燥，检査已完成的凝胶酶区带的显示。 一、抽提物的制备 1. 按常规方法培养细胞达 2×10 7 ...

固定细胞，顺序加入一抗和二抗，通过 UV 光观察。 1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片，置于合适的培养皿中。如 13 mm 盖玻片可用24 孔板。 2. 将培养皿置于 -20°C，10 min，再加入冷的固定剂（5 % 醋酸乙醇溶液（放在 -20°C ）），静置 20 min 。 3. 去除固定剂，在 D-PBSA 中洗盖玻片，加入 1 ml 正常猪血清，室温下放置 20 min。 ...

将培养物移至另一培养箱，关闭空培养箱电源，然后用去污剂和乙醇擦洗，开启加热开关，以便使培养箱干燥。盘中换新鲜水，重新通入 CO2。 1. 将全部培养物移至另一个 CO 2 培养箱，或将培养物装入可密封的容器中（如干燥器），通入 CO 2 气体，然后放置于普通培养箱或温室中。 2. 将准备清洁的温箱断开电源。 3. 将温...

在无抗生素情况下，至少将细胞培养一周，将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中，孵育 3~5d ，将细胞固定和染色，寻找细胞核之外的荧光。 1. 将指示细胞（如 3T6，NRK，Vero，A549）接种于培养皿（6 cm 直径）中，不要使用抗生素，接种的细胞数可以在 4~5 天产生50%~60% 的汇合层就足够了（如 2×10 4 NRK或 1×10 5 A549 ...

1. 染色： 镀银法，苏木精复染（显示细胞核） 2. 肉眼观察： 肠系膜呈棕黄色，由于铺片厚度不一，故颜色深浅不均。其中血管染成深棕色，粗细不等，纵横交错。 3. 低倍镜观察： 肠系膜表面为单层扁平上皮（间皮）覆盖，间皮细胞紧密连成一片，细胞之间有不规则的深棕色的细线。血管及其分支着色深。选择无血管且染色清晰的部位，移至视野中央，转高倍镜观察。 ...

1. 染色：HE 2. 肉眼观察： 标本为小肠横切；管腔内有许多细小的指状突起，突起表面就是要观察的上皮组织所在处。 3. 低倍镜观察： 找到小肠腔面，可见许多长短不一的肠绒毛，表面被覆单层柱状上皮。选择结构清晰的垂直切面，移至视野中央，转高倍镜观察。 4. 高倍镜观察： 上皮细胞呈高柱状，排列紧密而整齐。核呈椭圆形，染...

通过冲洗单层培养物或通过离心重悬非贴壁细胞，以高浓度抗生素清洗培养物数次，然后将培养物传代，用加抗生素的培养基传三次，再用不加抗生素的培养基传三次，每次传代后都要检测是否污染。 一般的原则是应将污染的培养物丢弃，而不要试图去除污染，除非是至关重要必须保留的细胞系才考虑去除污染。在任何情况下，很难做到完全消除污染。特别是在酵母污染时，如果试图去除污染，可能导致产生更顽固的对抗抗生素的细胞。 1. 仔细收集污染培养液，如有可能，应测试该有机体...

1.  切下组织并立即剪成小块，置于液氮中冻结。 2.  将200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵和研杵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每100 mg 组织用1. 2 ml 消化缓冲液悬浮。 3.  500 g 离心细胞5 min，弃上请。贴壁生长细胞先用胰酶消化。 4.  细胞用1~10 ml 冰冷的PBS重悬，500 g 离心5 min，弃上清，重复1次。 5....