淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物（简称AET）处理的绵羊红细胞（SRBC）混合后，其中全部T淋巴细胞均能吸附AET—SRBC，形成牢固稳定而巨大的E—花环，较正常未处理的SRBC形成的E—花环百分比为高，而且形成快速，不易脱落，重复性好。再经淋巴细胞分层液分离时，AET—E花环易沉于管底，而未形成E—花环的T淋巴细胞，用低渗液解花环周围的AET—SRBC，便可获得纯T淋巴细胞，而B淋巴细胞可直接取自分层液的界面。 1. AET—RRBC...

将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中，使两者互相扩散，当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时，沉淀线在两孔的中间。如抗体过量，沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量，沉淀线靠近抗体孔。此技术可以测定抗血清的效价。   此外，根据沉淀融合的情况，还可以鉴定两种抗原是否完全相同。两种抗原部分相同的情况下，则形成部分交叉和部分融合的沉淀线（如下图）。 1. 将盛有3 ml生理盐水琼脂的小试管置水浴中熔化。 ...

采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定在硝酸纤维膜上的雌二醇结合物相结合，固定有雌二醇结合物的检测线处就显现明显的颜色。 一、试剂与仪器 氯金酸；牛血清白蛋白、卵清白蛋白、兔抗鼠多抗；雌二醇标准品、雌二醇单抗、17β-Estradiol-6-one6-(o-carboxymethvyoxime)。硝酸纤维膜、玻璃纤维膜；Beckman Du530分光光度计；低温高速离心机；点膜机。 ...

一、材料和试剂 1.  DE32或DE52纤维素。 2. 待纯化标本：杂交瘤腹水或培养上清，免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。 3. 1.5×50 cm 层析柱；透析袋及其他透析和层析所需的试剂和器材。 4. 梯度洗脱液包括：0.005 mol/L，pH8.6 Tris-PO 4 ；0.055 mol/L，pH6....

一、材料和试剂 1.  DE32或DE52纤维素。 2.  HCl；NaOH；0.01～0.05 mol/L，pH8.0 PB；0.01 mol/L，pH8.6 Tris-Cl；0.5 mol/L NaCl。 3.  待纯化标本：杂交瘤腹水或培养上清，免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。 4.  1.5×50 cm 层析柱；透析袋；紫外分光光度计及其他透析和层析...

1.  称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50 g，置于1 000ml烧杯中，先以蒸馏水漂浮除去细颗粒，再经酸碱处理后，用0.01～0.05 mol/L，pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。 2.  将水分抽干，或用布氏滤斗(内放两层滤纸)过滤，收集湿纤维素，以降低其离子强度。按1 ml血清加湿重5 gDEAE纤维素，经过充分搅拌，置4℃吸附1 h。上清液可再如此处理一次，即获得较纯的IgG。 ...

将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时，沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影，就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中放出的射线，作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影，再经过显影把“像”显示出来。这样,能检出肉眼看不见的沉淀线，从而提高反应的敏感性，这种方法可应用于凝胶中的所有反应。 一、材料 1.  放射性同位素标记的抗原或抗体 2.  X—射线胶片或全色胶片 ...

标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组织中的抗原进行定位检测。不标记抗体法又可分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。前者利用基因工程方法制备双特异性抗体的F(ab′)2，一个Fab片段与标本中的抗原结合，一个Fab是抗体蛋白的结合片段...

标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组织中的抗原进行定位检测。不标记抗体法又可分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。前者利用基因工程方法制备双特异性抗体的F(ab′)2，一个Fab片段与标本中的抗原结合，一个Fab是抗体蛋白的结合片段...

1. 将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24 小时，室温下不超过6 小时，否则废弃） 2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS 溶液冲洗3-5 次，将污血冲洗干净为止。 3. 用手术钳夹紧脐带下端，加入15ml 的胶原酶（1mg/ml）室温下消化15-20分钟，并不时上下摇动脐带 4. 消化完后，将下端手术钳松开，消化液流入一个50...