DNA结合蛋白测定实验
1. 用一种或多种限制性内切酶在100 μl 体积中消化10 μg 质粒人,产生25~100 bp 的含有结合位点的DNA片段,并至少有一端是5’突出的。 2. 加100 μCi[α- 32 P]dNTP,4μl 5 mmol/l 3种NTP的混合液,2.5U Klenow酶。室温温育20 min。 3. 加4 μl 含有5 mmol/l 与被标记的相...
查看详情1. 用一种或多种限制性内切酶在100 μl 体积中消化10 μg 质粒人,产生25~100 bp 的含有结合位点的DNA片段,并至少有一端是5’突出的。 2. 加100 μCi[α- 32 P]dNTP,4μl 5 mmol/l 3种NTP的混合液,2.5U Klenow酶。室温温育20 min。 3. 加4 μl 含有5 mmol/l 与被标记的相...
查看详情本试剂盒采用独特的两相分离技术,结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的方法达到纯化基因组DNA的目的。适合从3ml的抗凝人或哺乳动物全血获得100 μg的基因组DNA,抗凝鸟类或两栖动物全血中获得多至120 μg的基因组DNA。 一、试剂盒组成、贮存、稳定性 说明书,耗材:中量制备管、中量滤器、连接管、塑料扳手、中量管盖。 Buffer VL:细胞和病毒裂解液,室温密闭贮存。 ...
查看详情木瓜酸可以破坏红细胞表面带电荷的唾液酸,从而降低红细胞表面电荷,使其得以靠拢,具有特异性的不完全抗体能与酶处理的具有相应抗原的红细胞发生凝集. 1、取4支洁净小试管分别标明“1”“2”十对照”“一对照”、 2、‘1’管内加受血者血清和供血者5%红细胞悬液各1滴,“2’管内加供血者血清和受血者5%红细胞悬液各1滴,“+”管内加5%D红细胞盐水悬液和不完全抗D血清各一滴,“一”管内加5%D红细胞盐水悬液及正常人AB型血清各1滴. ...
查看详情Rh血型鉴定系采用不完全抗体血清,属IgG型,分子量小.在生理盐水介质中不能与相应红细胞发生凝集,木瓜酸可以破坏红细胞在表面带电荷的唾液酸.从而降低红细胞表面电荷,使其得以靠拢,使其有特异性不完全抗体能与经酶处理的具备相应抗原红细胞发生凝集。 1、制备酶处理红细胞县液:将受检者,D对照,d对照三种红细胞用生理盐水洗涤1次,离心,各取压积红细胞1滴,分别加入上述配制的木瓜酶l滴.混合置37℃水浴l0min,取出,用盐水再洗涤1次,各配成5%红细胞生理盐水悬液。 ...
查看详情供受血液者红细胞某些血型抗原可与相应抗体在盐水介质中发生凝集 一、实验操作:抽取供受血者静脉血各3-4ml分离血清,取各自红细胞区配成5%悬液 反应物(滴) 主管 次管 PS+DC DS+PC 自身对照 受血者血清 1 ...
查看详情红细胞血型抗原与相应抗体特异性结合,可发生凝集反应,通过正反定型试验来确定ABO血型. 一、实验试剂: 1、抗A、抗B及抗A+B分型血型 2、5%A、B、O对照红细胞盐水悬液 3、受检者血清 4、受检者5%红细胞盐水悬液 二、实验操作: 1、取洁净小试管3支,分别标明抗A、抗B和抗A+抗B,用滴管分别加入抗...
查看详情血液离体后于接触带负电荷的表面(玻璃器材)时Ⅻ因子被激活,其后以一系列凝血因子相继活化最后使纤维蛋白原转化为纤维蛋白,此过程所需时间称凝血时间. 1、取内径8mm的洁净试管2支 2、以消毒注射器静脉采血2mL注入备好的试管中,每管1ml,静止37℃水浴中. 3、置水浴中5分钟后,每隔半分钟倾斜试管一次,至血液凝固(倒置试管血液不流动)为止,同时观察第2管,按两管血液凝固的平均时间报告. ...
查看详情血液完全凝后,由于血小板所释放的血栓收缩蛋白的作用,纤维蛋白网发生收缩,血清被析出.而凝血块退缩,这一现象对微血栓创伤后止血有重要意义,血块退缩情况如何.主要取决于血小板的量与质,纤维蛋白原浓度.Ⅶ因子水平,红细胞比积及实验时的温度也有一定影响. 自静脉采血1-2ml的注入内径8mm的试管内或继凝血时间测定后,试管加塞置于37℃孵育箱内,分别于1小时,18小时及24小时进行观察。 观察结果: 1、血块完全退缩...
查看详情尿素液能溶解红细胞及白细胞而保存完整形态的血小板,经稀释后在血细胞计数地内直接计数以求得每升容积血液内的血小板数. 一.实验试剂:血小板稀释液 尿素(uren)10g/枸橼酸钠0.5g/40%甲醛0.1ml/蒸馏水加至100mL完全溶解后过iha ,置冰箱保存.四、实验方法: l、清洁小试管加入血小板稀释液0.38ml. 2、先让手指温暖充直,皮肤消毒待干后深刺使血液自然流出擦去刚出现的少量血,(最好采用静脉...
查看详情电阻抗法:电路和电流与计数小孔直径成正比,当细胞通过小孔时直径变小,电流变小,将内电极与电容相接每个细胞通过小孔时形成一个脉冲,从而达到分析全血的目的. 严格遵照仪器说明书或操作手册进行,但一般仪器操作程序为: 1、开机程序:开机后,机器冲洗.本底测试检查稀释液是否污染及有无电磁干扰, 2、测定:吸样→稀释→混匀→(溶血)→计数→排废液→清洗3、关机程序:清洁,冲洗,关机 ...
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