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离体主动脉条的标本制备实验

取兔或大鼠一只,猛击其头致死,立即剖开胸腔,分离胸主动脉,尽可能于近心脏处把其切断,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的培养皿中,剔除血管外结缔组织及脂肪,洗去凝血块,轻轻套在较主动脉稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪把主动脉作螺旋形剪开,制成宽约3mm、长1.5~2cm的主动脉条,两端分别用线结扎,置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的恒温37℃的麦氏浴管内,平稳90~120min后进行实验。也可把胸主动脉剪成多个宽2mm的动脉环代替血管条做实验。 ...

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制备DNA测序模板实验-双脱氧测序的双链质粒DNA的碱变性

1.  加入约0.5 pmol 重组质粒DNA于0.5 ml 微量离心管中,如果体积大于20 μl 应以乙醇沉淀,重溶于20 μl 水。 2.  如果体积小于20 μl,用水补足20 μl。 3.  加入2 μl 2 mol/l NaOH / 2 mmol/l EDTA,用微量移液器上下抽吸轻轻混匀,于25~37℃温育5 min 后,样品置于冰浴,加入水,用微量移液器彻底混匀。 ...

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寄生虫标本的包装与邮寄实验

一、液浸标本 即用70%酒精或5%~10%福尔马林等固定液保存的标本,装于大小适当的玻璃瓶或塑料管(瓶)内,附上铅笔写的记录标签,如满保存液,不留空隙,盖紧瓶(管)塞,用蜡封口,随后,将之放于木匣内,两者之间的四周可用碎纸或棉花塞紧,将木匣装钉严密,匣面注明瓶子朝上一端的记号,即可邮寄。 二、干制标本 主要是干制昆虫标本,单个针插于玻璃管内或多量昆虫存放于玻璃瓶(管)内,同...

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麻醉大鼠动脉血压的测定实验(直接测定法)

反映动脉血压变化的指标有三个,它们是:收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic bloodpressure,DBP)、平均动脉压(mean blood pressure, MBP) (1)颈总动脉测量动脉血压:取体重为200~250g左右的大白鼠,用20%氨基甲酸乙酯注射液0.5ml/100g或者1.5%戊巴比妥钠注射液0.2ml/100g,腹腔注射麻醉,待动物被麻醉后,将其固定在实验台上,颈总动脉分离(见本...

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清醒大鼠的血压测定实验

大鼠尾部加压超过收缩压时,脉搏消失,压力减至收缩压时,脉搏出现,继续减压至舒张压时,脉搏恢复加压前的水平,通过检测这种脉搏变化时的瞬间压力,即为血压值。 清醒大鼠的血压测定有多种方法。按是否进行手术分为有创和无创;按测定方式分为直接和间接,一般直接法都是有创的。 直接法又分为导管法和换能器埋入腹腔遥测法,前者插入大鼠动脉的导管通过换能器与记录系统有连接,测量时清醒大鼠的活动受一定的限制,后者插入动脉的导管、换能器与记录系统无任何连接,测...

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狗和猫前、后肢静脉取血实验

前肢选用内侧皮下头静脉,位于前肢前部,在下1/3处向内侧走行;后肢选用外侧的隐静脉,位于跗关节外侧,距跗关节上方5~10cm处的皮下,由前斜向后上方走行。采血时,先将狗固定,用止血带扎住穿刺部位的上方,使静脉充盈。操作者手持注射器采血。 ...

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制备DNA测序模板实验-小量裂解物中制备λ噬菌体DNA

1.  在新鲜配制的λ顶层琼脂糖和λ琼脂糖平板上,通过在平板上裂解适于λ噬菌体生长的大肠杆菌菌株,制备重组λ噬菌体毒种原液。 2.  取700 μl 毒种液加入无菌的1.5 ml 微量离心管中,加入1 μl 1 mg/ml 的DNA酶Ⅰ及1 μl 1 mg/ml 热处理过的RNA酶A,于37℃温育30 min。 3.  加入700 μl λPEG溶液,冰浴放置1 h。 4.  4...

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cDNA文库构建

cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。 经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头,连接到适当的载体中获得文库。 其基本步骤包括:(1)mRNA的提纯获取高质量的mRNA是构建高质量的cDNA文库的关键步骤之一。(2)cDNA第一条链的合成。(3)cDNA第二条链的合成。(4)双链cDNA的修饰。(5)双链c...

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家兔心脏取血实验

在第三肋间胸骨左缘 3mm 心脏搏动最强处,将针头垂直刺入心脏,血即进入注射器。一次可取血 20 ~ 25ml。 ...

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家兔大血管取血实验

可采用颈静脉、股静脉和后肢小隐静脉取血。 (1)颈静脉和股静脉取血:首先麻醉做血管分离术。然后用注射器沿血管方向刺入抽取血液。 (2)后肢小隐静脉取血:首先使动物仰卧然后固定,在小腿上端扎橡皮管,小腿外侧皮下可见充盈的静脉,经皮穿刺可以取血。 ...

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