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人胰腺癌裸小鼠模型的建立实验

将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下,每周测量肿瘤大小,第42d处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查,放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养,HE 染色。 一、实验讨论 胰腺癌是恶性程度高、发展快、预后极差的肿瘤,早期症状不典型,至出现明显症状时,多已进入晚期,失去了根治机会。对传统的放、化疗不敏感,即使是成功地实施了手术的病人,由于术后易转移,5 年生存率仅接近20 % 。 ...

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YAC克隆的分析实验-基本方案

1.  用接种棒将含重组载体pYAC的AB1380菌株划线接种在AHC平板上,倒扣平板于30℃培养,直至长出1~3 mm 大小的红色菌落为止。 2.  短期保存:用Parafilm膜将平板周围封起来,于4℃可保存4~6周。 3.  长期保存:接种一个单独的YAC克隆的菌落于3.2 ml YPD培养基中,在30℃摇床过夜,然后加入1 ml 80%甘油,混匀,再分成0.2~1.0  m...

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人肺癌裸鼠原位移植模型的建立实验

利用逆转录病毒转染法将增强型绿色荧光蛋白基因导入人肺癌大细胞系NCI-H460,采用外科原位移植法建立肺癌原位移植模型。定期通过小动物活体荧光成像系统观察肿瘤生长,利用相关性检验分析荧光面积和肿瘤体积之间的相关关系,并观察原位移植术后裸鼠的生存期和肿瘤转移情况。 一、实验讨论 体内移植模型是肿瘤实验研究的主要方法。1969年Rygaard等首次成功地在裸小鼠中移植人结肠癌以后,人们开始利用裸小鼠进行肿瘤移植的研究。皮下移...

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体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验

抗药性细胞模型的筛选大多采取长时间药物处理、诱导抗性,最总筛选出具有一定抗性的细胞克隆。 一、培养条件 用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO 2 ,37℃培养。 二、实验步骤 1.  将CHO细胞培养在含10%血清的DMEM培养液中,先用DOX(阿霉素)0.01 ug/ml 诱导培养CHO细胞3个月。 ...

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激光扫描共聚焦显微镜使用说明

激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。 由于激光束的波长较短,光束很细,所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力,大约是普通光学显微镜的3倍。系统经一次调焦,扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显...

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人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型的建立实验

先用组织学完整的新鲜人肝癌组织接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤,然后用此移植瘤组织再接种于裸鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型(间接肝原位移植瘤模型),并将其与直接肝原位移植瘤模型、皮下移植瘤模型和腹腔内移植瘤模型作比较。 一、实验讨论 目前,肝癌的复发和转移仍然是其术后长期存活的主要障碍。为了研究肿瘤的转移机制,建立接近于人体的肿瘤动物模型显得尤为重要。早期建立的动物移植瘤模型,移植瘤虽能维持来源肿瘤的组织结构和生化特性,但很...

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动物体内抑瘤实验

活体生物发光成像技术的原理:在小型哺乳动物体内利用报告基因(荧光素酶基因)表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+ 存在的条件下消耗ATP发生氧化还原反应,将部分化学能转化为可见光能释放。因此只有在活细胞内才会发生发光现象。并且光的强度与标记细胞的数目线性相关。 一、讨论 基于生物发光原理的活体动物肿瘤成像技术方法,能准确标记和得到边界清晰的实时在体肿瘤影像,可以有效解决染料荧光标记技术特异性差、干扰信...

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肿瘤动物模型建立实验-诱发性肿瘤动物模型

诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。 1.芳香胺及偶氮染料类致癌物的特点 (1)通常需要长期、大量给药才能致癌; (2)肿瘤多发生于远隔作用部位的器官如膀胱、肝等; (3)有明显的种属差异; (4)其本身不是直接致癌物,致癌是由于其某种代谢产物的作用; (5)其致癌作用往往受...

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转基因小鼠制备实验

1.  选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。 2.  47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。 3.  第二天上午9:00前观察供体、受体,有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。 4.  10:30左右,断颈处死供...

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肺结核患者痰标本抗酸染色实验

分枝杆菌一般不易着色,经加温或延长染色时间而着色后,能抵抗酸酒精的脱色作用,故又称抗酸杆菌。对人有致病性的分枝杆菌主要是结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。 1.  结核杆菌和麻风杆菌的形态染色有哪些异同点? 2.  结核杆菌有哪些培养特性? 1.  取痰中粘稠脓性或干酪样带血丝部分涂片(略厚),自然干燥后,通过火焰固定,于涂片外周用蜡笔划圆。 2.  用木夹持玻片,滴加石炭酸复红染液,以盖满标本...

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