这个方案可以在一天内快速制备数以百计的质粒。 1.  在96孔微量滴定板上每孔中加人0.3 ml TYGPN培养液，每孔中接种一个含有质粒的单菌落，于37°C培养至饱和状态（约48h)。 2.  饱和培养液于4°C，以600 g用带有微孔板卡槽的H-1000B转子离心10 min，轻轻甩去每孔中的上清液。 3.  将平板夹在多管涡旋混合器上置4挡振荡20 s，重悬细菌。 ...

用已知的伤寒杆菌H，O抗原和甲，乙型副伤寒杆菌H抗原，与病人血清作定量凝集试验，以测定患者血清中有无相应抗体，根据抗体含量的多少及增长情况，可帮助诊断伤寒及副伤寒。 1.  怎样从急性菌痢患者粪便中分离与鉴定痢疾杆菌？ 2.  肥达反应中为什么要用"H"，"O"，"PA"，"PB"四种抗原？ 3.  怎样分析本实验室各组肥达反应的结果？ 1.  取小试管28支，分四排置于试管架上，每...

1.  用无菌接种环挑取少量标本划线接种于中国兰琼脂平板或S-S 琼脂平板上。（必要时增菌培养6～12 小时后，再进行分离培养）。 2.  用无菌接种针从选择性培养基上挑选无色透明较小的可疑菌落接种在半固体双糖含铁培养基上进行纯培养及初步鉴定。 3.  根据在半固体双糖含铁培养基生长情况初步鉴定，进一步进行其它的生化反应试验（单糖发酵，靛基质试验等），再用诊断血清进行玻片凝集试验，做出最后鉴定。 ...

肠道杆菌是一大群革兰阴性，中等大小，两端钝圆的杆菌。。不产生芽胞，大多数有鞭毛和菌毛。它们的形态相似。 1.  观察大肠杆菌，伤寒杆菌，痢疾杆菌革兰染色标本片。 2.  观察上述细菌在中国兰琼脂平板上或S-S 琼脂平板上生长情况。 3.  观察上述细菌在半固体双糖含铁培养基上生长情况和靛基质试验。 4.  观察变形杆菌在普通琼脂平板上的迁徙现象及在尿素培养基中生长结果。 ...

1.  用含10%胎牛血清的完全培养液稀释处于指数生长期的Sf9细胞至约5×10 6 细胞/ml。在蚀斑试验之前几小时，以两个不同的密度将细胞种于60 mm 组织培养皿中。病毒毒种贮液的每--稀释度均设复孔，于27℃培养。 2.  如下用无血清完全培养液制成5 ml 的病毒贮液的系列稀释液： （1）纯病毒毒种贮液：10 -6 ...

利用人工制备的ASO胶乳试剂进行间接凝集试验，借以判断病人血清中ASO抗体含量。ASO胶乳试剂系人工结合链球菌溶血素"O"（SLO）的免疫微球。进行本试验时，先在病人血清中加入一定量的标准SLO，使血清中ASO与SLO结合，（产生中和反应），然后再加入胶乳试剂，未被中和的ASO抗体则可与该试剂反应，产生清晰均匀的凝集颗粒，即为阳性结果；反之为阴性。 1.病人血清标本用生理盐水稀稀成1：50，以56 ℃水浴30 分钟，灭活补体。 2. ...

从单层培养中制备： 1a.  以毎瓶1.8×10 7 Sf9细胞的密度，将细胞接种于两个150 cm 2 培养瓶，在含10%胎牛血清的完全培养液中培养。于27℃让细胞贴壁3 h，然后移去完全培养液。以感染复数为0.1的病毒量，加入5 ml 含野生型或重组病毒的无血清完全培养液。于27℃温育1 h。 2a.  去掉病毒接种物...

试验时将病人血清与已知溶血素"O"先混合，作用一定时间后再加入红细胞。红细胞不被溶解为阳性反应，如红细胞被溶解为阴性反应。用于测定血清中抗"O"抗体及其含量（用单位表示，单位是血清中抗体效价的倒数）当抗体效价增高到400单位以上时，表明该患者不久前有溶血性链球菌感染，结合临床症状，有助于活动性风湿热的诊断。 1.  将待检血清置56 ℃水浴箱中加热30 分钟灭活，用pH6.5 缓冲液配成1：200稀释血清。 2.  取小试管5支，分别...

1.  将4 ml 含10%胎牛血清的完全昆虫细胞培养基加入一个25 cm 2 培养瓶。取出一支冻存Sf9细胞的安瓿，迅速置于37℃水浴，用手前后剧烈摇动融化之，当安瓿的内容物几乎完全融化时，将安瓿浸入70%乙醇，消毒外壁。 2.  打碎安瓿颈部，将内容物转移至25 cm 2 培养瓶，用手轻轻摇动培养瓶，使细胞分散均匀，于27℃温育2...

碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。 1.  接种一个单菌落于5 ml无菌LB培养液中，在37°C培养至饱和状态（过夜）。 2.  取1.5 ml培养液以最大转速离心20 S。弃上清。 3.  沉淀用100 μlGTE溶液彻底重悬并于室温静置5 min。 4.  加人200 μl NaOH/SDS溶液，用指头敲击管壁混匀，于冰上放置5 m...