推荐采用本方案从1~24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA，尽管该方案十分快捷，但制备的DNA的质量要比碱裂解法差。 1. 参考文献： Birnboim，1983； Heetal，1991；Holmes and Quigley，1981。 2. 撰稿人： JoAnneEngebrecht，Roger Br...

毒素与抗毒素在琼脂内扩散相遇，当其比例适合时可形成肉眼可见的特异性沉淀线。本试验法代替动物皮内试验，其优点为简便，不需动物，且与动物试验结果基本一致。 如待检菌株有毒力则与含白喉抗毒素的滤纸片之间出现一条清晰的白色沉淀线；如设有阳性对照，则此沉淀线往往与阳性对照株的沉淀线相吻合。 取磷酸盐蛋白琼脂11ml加热溶解，待冷却至50 ℃倾入已灭菌的7.5 cm直径的平皿中。 待凝固后，放入37℃温箱约一小时使培养基表...

白喉棒状杆菌属革兰阳性杆菌，有异染颗粒且呈特殊排列。 观察白喉棒状杆菌革兰染色和异染颗粒染色标本片。 白喉棒状杆菌培养特征观察：观察白喉棒状杆菌在吕氏血清斜面和亚碲酸钾血平板上的菌落特点。 异染颗粒染色法：奈瑟染色法 奈瑟染色法：取培养于吕氏血清斜菌的白喉棒状杆菌培养物用生理盐水混合制片。将奈瑟染液的第一，二液的混合液加于已经火焰固定之标本片上，染1-3分钟，水洗，再用第三液染半分钟...

厌氧培养的方法及其原理如何? 1.  将已接种细菌的血平板以及产气管，指示剂，催化剂放入塑料袋内，排出袋中气体，卷叠好袋口，并用大铁夹将塑料袋夹紧密，以防漏气。 2.  折断产气管，管内发生反应，产生CO 2 和H 2 。CO2供细菌生长需要，能促使许多厌氧菌生长，钯催化剂可催化H 2 和袋内的O ...

用无菌接种环取破伤风梭菌肉渣培养物，分区划线接种于血琼脂平板上，取方形玻璃板一块，中央置无菌纱布块，放1克焦性没食子酸于纱布上，然后再向纱布上滴加10%NaOH约1毫升，焦性没食子酸与碱性溶液混合后，可以吸收氧气变为棕黑的焦性没食子橙而造成厌氧环境，立即将种有细菌之平板倒盖于方形玻璃板上，并在平板四周用熔化石蜡密封。置37 ℃温箱中培养24～48小时后，取出观察结果。 ...

厌氧芽胞梭菌均为革兰染色阳性，都能形成芽胞，其形状大小及位置因菌种而异，可作为菌种鉴别的参考；营养要求不高，但需厌氧环境才能生长。常见致病菌有破伤风梭菌，气性坏疽病原菌和肉毒梭菌，破伤风和气性坏疽为严重的创伤传染病，在战时尤为重要。肉毒梭菌为食物中毒病原菌。 1.  观察破伤风梭菌，肉毒梭菌芽胞染色标本及产气荚膜梭菌的荚膜染色标本片。 2.  观察破伤风梭菌，产气荚膜梭菌在庖肉培养基中的生长特点和血平板上的菌落特点。 ...

该培养基用酚红作指示剂，碱性时呈红色，酸性时呈黄色，上层培养基中的乳糖用于鉴别肠道杆菌，致病菌不分解乳糖而大肠杆菌则能分解乳糖产酸使上层斜面变为黄色。还可检查细菌能否分解含硫氨基酸产生硫化氢，若产生硫化氢则与硫酸亚铁作用形成黑色硫化亚铁。硫代硫酸钠起还原作用，以防止硫化氢被氧化而影响结果。下层为含葡萄糖的半固体培养基，可以观察细菌有无动力及对葡萄糖的分解能力。 上层：肉膏汤1000 毫升，硫酸亚铁0.2 克，硫代硫酸钠0.3 克，乳糖10 克，0.2%酚红水溶...

1.  中性红为指示剂，在酸性时呈红色，在碱性时呈淡黄色，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色，中性红可被光线破坏，应将培养基保存于暗处。 2.  枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠杆菌的生长，枸橼酸钠不抑制肠道致病菌。煌绿和中性红对细菌都有一定的毒性。硫代硫酸钠能中和中性红，煌绿的毒性，且能使大肠杆菌的红色菌落颜色鲜明。枸橼酸铁也能中和中性红，煌绿的毒性作用。胆盐与枸橼酸钠，硫代硫酸钠合用时，能加强对大肠杆菌...

1.  中国兰为指示剂，其水溶液煮沸灭菌后备用。蔷薇酸乙醇溶液，无需灭菌，但加入培养基时应避开火焰，以免燃烧。 2.  中国兰在酸性环境中呈兰色，在碱性环绕中呈红色，蔷薇酸在酸性环境中呈黄色，在碱性环境中呈淡红色，此培养基制成后，pH 7.4，呈淡紫红色，过碱呈鲜红色，过酸呈兰色都不适用，接种大肠杆菌后，因分解乳糖产酸，故菌落呈兰色。伤寒杆菌等不发酵乳糖者，菌落无色或淡红色。蔷薇酸（玫瑰红酸）能抑制革兰阳性菌的生长。 将乳糖加入已灭菌的肉膏液琼脂中，然后煮...

这个方案可以在一天内快速制备数以百计的质粒。 1.  在96孔微量滴定板上每孔中加人0.3 ml TYGPN培养液，每孔中接种一个含有质粒的单菌落，于37°C培养至饱和状态（约48h)。 2.  饱和培养液于4°C，以600 g用带有微孔板卡槽的H-1000B转子离心10 min，轻轻甩去每孔中的上清液。 3.  将平板夹在多管涡旋混合器上置4挡振荡20 s，重悬细菌。 ...