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生物因素对细菌的影响实验-噬菌体的特异溶菌现象

噬菌体有一定的形态结构和严格的寄生性,须在活的易感的细菌细胞内增殖。通常能将其裂解,在平板上进行试验,可出现空斑即噬斑。噬菌体的溶菌作用具有高度的特异性,故可用噬菌体鉴定菌种及菌型。 噬菌体的特异溶菌现象在医学实践上有何意义? 1.  在琼脂平皿底上用蜡笔划两个直径2 厘米的圆圈,标明1 ,2。 2.  以接种环分别取菌,在1 处均匀涂布痢疾杆菌培养物,2 处涂布大肠杆菌。 3.  ...

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生物因素对细菌的影响实验-细菌对抗生素的敏感试验(药物敏感试验--纸片法)

抗生素具有抑制和杀灭细菌的作用,各种致病菌对抗生素的敏感性不同,在治疗过程中,细菌对抗生素的敏感性也可能改变,产生耐药性变异,因此测定细菌对抗生素等药物的敏感程度,对于临床治疗选择用药及时有效的控制感染具有重要意义。 方法: 1.  取琼脂平板一块,用蜡笔在皿底玻璃上平均划分为四区,在每区靠皿边处分别注明青(霉素),链(霉素),红(霉素),庆(大霉素)标记。 2.  用灭菌接种环取葡萄球菌菌液两环,以...

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粘粒和质粒克隆的纯化实验

1.  通过原位杂交检测硝酸纤维索滤膜上影印菌落。 2.  用无菌的牙签挑出阳性克隆,接种到含适当抗生素的1 ml 冷的LB培养基中,保存在4℃抑制细菌生长。 3.  取1~25 μl 菌悬液涂布在含有相同抗生素的平板上,37℃培养过夜,在直径100 平板上长出25~250个菌落为宜。 4.  将菌落影印在硝酸纤维素滤膜上,变性、复性、烤膜和杂交化。 ...

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理化因素对细菌的影响实验-常用化学消毒剂对细菌的作用

各种化学消毒剂对细菌的影响不一,有的使菌体蛋白质变性,有的破坏菌细胞膜,有的能阻碍细菌代谢的某些环节;因而呈现不同的抑菌或杀菌作用。 1.  用1 毫升无菌吸管取萄葡球菌18 小时肉汤培养物0.1 毫升,滴于琼脂平板的中央。 2.  用无菌棉签将菌液均匀涂布于整个平板表面。 3.  待菌液干后,用无菌镊子夹圆形滤纸片,分别蘸取生理盐水,0.1% 新洁尔灭,2.5%碘酒,2% 红汞及2%龙胆紫,轻轻平放于培养基...

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理化因素对细菌的影响实验-滤菌器的除菌作用

滤菌器由孔径极小,能阻挡细菌通过的陶瓷,硅藻土,石棉或玻璃细纱等制成。种类较多,但常用者为蔡氏(Seitz)滤菌器,由金属漏斗和嵌在其中的石棉滤板组成。各种滤板的滤孔大小不同,EK 板滤孔较小,(EK 为Eatkeimurkg 之缩写,意为无菌)常用以除去一般细菌。 将石棉滤板装入漏斗,用牛皮纸包扎后与滤瓶均高压灭菌,于使用时,打开包纸取出滤菌器,装在滤瓶上,将滤瓶的倒管与抽气机的抽气橡皮管相连。倒入被滤液体,开动抽气机。滤毕,关闭抽气机。先将抽...

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理化因素对细菌的影响实验-紫外线杀菌试验

紫外线在波长为2000~3000者具有杀菌能力,细菌经紫外线照射后,可在DNA中产生胸腺嘧啶双聚体,从而干扰了DNA 的复制,使细菌死亡,常用于手术室的空气消毒。但紫外线的穿透性不强,可被普通玻璃及纸片所吸收。 1.  用无菌接种环取大肠杆菌肉汤培养物二环,在整个琼脂平板表面平行密集划线;用同样方法取枯草杆菌划线接种于另一只琼脂平板,分别作好标记。 2. 将己种菌的两个琼脂平板分别去掉皿盖,用镊子通过火焰灭菌后,夹取无菌黑纸片一张,置...

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理化因素对细菌的影响实验-高压蒸气灭菌法

高压蒸气灭菌是在高压灭菌器内进行。高压灭菌器有坚固的双层金属壁蒸锅和严密的盖,并附有排气及安全阀门,压力表等装置。加水于底部夹层锅内,加热煮沸,使产生的蒸气密闭在容器内,不能向外扩散。因而蒸气压力逐渐升高,温度也随之相应地增高。 1.  加水至锅内达规定的水平面,放入待灭菌的物品,把锅盖按对称的螺旋先后对称用力(切勿单个)依次扭紧,使锅盖确实均匀密闭。 2.  锅下用煤气炉,电炉或火炉加热,若系蒸气加热装置者,则可直接将蒸气通入灭菌器...

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细菌代谢产物的观察实验-色素产生试验

有些细菌能产生色素,可作为鉴别某些细菌的根据。 将金黄色葡萄球菌及绿脓杆菌分别划线接种于琼脂平板上,置37 ℃温箱培养24 小时后,取出观察两菌所产生的色素。金黄色葡萄球菌的色素仅使菌落呈金黄色,属脂溶性色素;绿脓杆菌的色素则弥散至培养基中,使整个培养物呈现绿色,属水溶性色素。 ...

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细菌代谢产物的观察实验-硫化氢产生试验

某些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸生成硫化氢,硫化氢与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁作用而生成黑色的硫化铅或硫化亚铁沉淀,黑色沉淀愈多,表示生成的硫化氢量也愈多。 某些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸生成硫化氢,硫化氢与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁作用而生成黑色的硫化铅或硫化亚铁沉淀,黑色沉淀愈多,表示生成的硫化氢量也愈多。 ...

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细菌代谢产物的观察实验-靛基质(吲哚)生成试验

有些细菌具有色氨酸酶,能分解蛋白胨中的色氨酸生成靛基质,但靛基质无色,不易观察,加入柯氏靛基质试剂后,试剂中的对二甲氨基苯甲醛与靛基质结合,形成红色的玫瑰靛基质,很易识别。 将大肠杆菌,伤寒杆菌及乙型副伤寒杆菌分别接种于含有丰富色氨酸的蛋白胨水中,37 ℃培养24~48小时后取出,在上述细菌的培养液内各加入柯氏试剂数滴。略加振摇,静置半分钟后,在两液接触面出现玫瑰红色环者,为靛基质试验阳性以"+"标记之,不出现红色环者为阴性,以"一" 标记之。 ...

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