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细菌代谢产物的观察实验-糖发酵试验

由于各种细菌具有不同的酶,故分解糖类的能力不同,分解糖类后的终末产物亦不一致,例如肠道非致病菌一般均有乳糖酶,能分解乳糖产酸(乳酸,甲酸,乙酸等),尚有甲酸脱氢酶。能将甲酸进一步分解产生气体( CO 2 ,H 2 ),而肠道致病菌一般无乳糖酶,不能分解乳糖,因此,细菌的糖发酵试验,可用于鉴别细菌。 用接种环分别取大肠杆菌,伤寒杆菌和乙型副伤寒杆菌少许,接种于葡萄糖及乳糖发酵管中各一支,置3...

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病原菌的鉴别实验

1.致病性葡萄球菌耐盐,在高盐培养基上能生长; 2. 致病性葡萄球菌能发酵甘露醇。 3. 当颗粒性抗原(如:细菌)与特异性抗体结合后,在有电解质存在的环境下,抗原抗体可凝集成肉眼可见的块状物。 1. 接种环取1-2环脓液标本增菌液,以分区划线的方法接种于6.5%高盐琼脂培养基上,置37℃温箱中,培养24小时。 2. 观察菌特征。 3. 取可疑菌落直接涂片镜检(革兰氏染色) 4. 取可...

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抗菌药物试管实验

1. 按无菌操作在每管中加入肉汤培养基1ml。 2. 于第1管加入原浓度药液1ml,混匀后吸取1ml加入第2管,同样混匀后吸取1ml加入第3管,依次类推,将药液对倍稀释至第9管后取出1ml弃去。第10管不加药物,作对照。 3. 第1管至第10管各加入上述菌液0.1ml,混匀。 4. 置37℃恒温箱经18~24小时培养后观察各管细菌生长情况。 5. 结果判断:以完全抑制细菌...

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质粒DNA的小量制备实验-煮沸小量制备法

当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的质量要比碱裂解法差。 1.  参考文献:Birnboim,1983; Heetal., 1991; Holmes and Quigley, 1981. ...

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中药体外抗菌打孔实验

1. 按无菌操作在琼脂平板上加入上述试验菌株0.1ml,用无菌L型玻棒涂布均匀。 2. 用灭菌打孔器在平板上均匀打孔1~5个。 3. 每孔加满待检药液。 4. 置37℃恒温箱经18~24小时培养后,观察各孔周围是否存在无细菌生长的圆形区域(抑菌圈),并测量抑菌圈的直径,判断细菌是否对该药物敏感及药物抑菌能力的大小。 ...

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中药体外抗菌作用纸片实验

1. 用灭菌接种环挑取适量金黄色葡萄球菌斜面培养物,从琼脂平板一侧开始,用密布划线法将细菌接种在平板上,边划线边转动平板,直到整个平板均匀划满为止,然后将接种环烧灼灭菌。 2. 用经烧灼灭菌的小镊子夹取吸有定量药物的纸片1~5片,均匀放置在平板表面,稍将纸片点压,使之与培养基较好接触。 3. 置37℃恒温箱经18~24小时培养后,观察各纸片周围是否存在无细菌生长的圆形区域(抑菌圈),并测量抑菌圈的直径,判断细菌是否对该药物...

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阴道毛滴虫检测实验

示教观察 1. 油镜观察溶组织阿米巴、阴道毛滴虫、疟原虫; 2. 肉眼观察绦虫、蛔虫、钩虫、蛲虫、丝虫、等寄生虫成虫的标本; 3. 显微镜下观察日本血吸虫、绦虫头节和虫卵、蛔虫、钩虫、蛲虫虫卵、丝虫微丝蚴; 4. 肉眼观察节肢动物的蛛形纲、昆虫纲。 1. 直接涂片法: 以消毒棉签拭取受检者阴...

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痰液检查实验

1. 肺吸虫卵检查; 2. 溶组织内阿米巴滋养体检查; 3. 棘球蚴的原头蚴检查; 4. 粪类圆线虫幼虫检查; 5. 蛔蚴检查; 6. 钩蚴检查; 7.尘螨检查。 1. 直接涂片法: 取1滴生理盐水于载玻片中央,以受检者铁锈色或带血的痰液少许与生理盐水混匀,加盖片镜检。检查阿米巴滋养体时,须用新鲜的痰液,立即涂片镜检,并注意保持温度在24℃~25℃,便于镜下观察活动的滋养体。多次涂片检查为阴性者,可改用浓集法。 ...

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活微丝蚴浓集检测实验

在离心管内加蒸馏水半管,加外周血10~12 滴,再加生理盐水混匀,离心(每分钟3000 rpm)沉淀3 分钟,取沉渣镜检。或取静脉血1ml,置于盛有3.8%枸橼酸钠0.1 ml的试管中,摇匀,加水9 ml,待红细胞溶化后,再离心2 分钟,倒去上清液,加水再离心,取沉渣镜检。 根据微丝蚴活动规律,采血时间应取晚间9时至次晨2时为宜。 ...

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质粒DNA的小量制备实验-96孔微量滴定板碱裂解法

当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。这个方案可以在一天内快速制备数以百计的质粒。 1.  在96孔微量滴定板上每孔中加人0.3 ml TYGPN培养液,每孔中接种一个含有质粒的单菌落,于37°C培养至饱和状态(约48 h)。 2.  饱和培养液于4°C,以600 g用带有微孔板卡槽...

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