质粒DNA的小量制备实验-煮沸小量制备法
当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的质量要比碱裂解法差。 1. 参考文献:Birnboim,1983; Heetal., 1991; Holmes and Quigley, 1981. ...
查看详情当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的质量要比碱裂解法差。 1. 参考文献:Birnboim,1983; Heetal., 1991; Holmes and Quigley, 1981. ...
查看详情1. 按无菌操作在琼脂平板上加入上述试验菌株0.1ml,用无菌L型玻棒涂布均匀。 2. 用灭菌打孔器在平板上均匀打孔1~5个。 3. 每孔加满待检药液。 4. 置37℃恒温箱经18~24小时培养后,观察各孔周围是否存在无细菌生长的圆形区域(抑菌圈),并测量抑菌圈的直径,判断细菌是否对该药物敏感及药物抑菌能力的大小。 ...
查看详情1. 用灭菌接种环挑取适量金黄色葡萄球菌斜面培养物,从琼脂平板一侧开始,用密布划线法将细菌接种在平板上,边划线边转动平板,直到整个平板均匀划满为止,然后将接种环烧灼灭菌。 2. 用经烧灼灭菌的小镊子夹取吸有定量药物的纸片1~5片,均匀放置在平板表面,稍将纸片点压,使之与培养基较好接触。 3. 置37℃恒温箱经18~24小时培养后,观察各纸片周围是否存在无细菌生长的圆形区域(抑菌圈),并测量抑菌圈的直径,判断细菌是否对该药物...
查看详情示教观察 1. 油镜观察溶组织阿米巴、阴道毛滴虫、疟原虫; 2. 肉眼观察绦虫、蛔虫、钩虫、蛲虫、丝虫、等寄生虫成虫的标本; 3. 显微镜下观察日本血吸虫、绦虫头节和虫卵、蛔虫、钩虫、蛲虫虫卵、丝虫微丝蚴; 4. 肉眼观察节肢动物的蛛形纲、昆虫纲。 1. 直接涂片法: 以消毒棉签拭取受检者阴...
查看详情1. 肺吸虫卵检查; 2. 溶组织内阿米巴滋养体检查; 3. 棘球蚴的原头蚴检查; 4. 粪类圆线虫幼虫检查; 5. 蛔蚴检查; 6. 钩蚴检查; 7.尘螨检查。 1. 直接涂片法: 取1滴生理盐水于载玻片中央,以受检者铁锈色或带血的痰液少许与生理盐水混匀,加盖片镜检。检查阿米巴滋养体时,须用新鲜的痰液,立即涂片镜检,并注意保持温度在24℃~25℃,便于镜下观察活动的滋养体。多次涂片检查为阴性者,可改用浓集法。 ...
查看详情在离心管内加蒸馏水半管,加外周血10~12 滴,再加生理盐水混匀,离心(每分钟3000 rpm)沉淀3 分钟,取沉渣镜检。或取静脉血1ml,置于盛有3.8%枸橼酸钠0.1 ml的试管中,摇匀,加水9 ml,待红细胞溶化后,再离心2 分钟,倒去上清液,加水再离心,取沉渣镜检。 根据微丝蚴活动规律,采血时间应取晚间9时至次晨2时为宜。 ...
查看详情当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。这个方案可以在一天内快速制备数以百计的质粒。 1. 在96孔微量滴定板上每孔中加人0.3 ml TYGPN培养液,每孔中接种一个含有质粒的单菌落,于37°C培养至饱和状态(约48 h)。 2. 饱和培养液于4°C,以600 g用带有微孔板卡槽...
查看详情取外周血一大滴,滴于薄血片的右端1/3处,以推片一角,将血滴自内向外作螺形摊开,形成直径1 cm大小的厚薄均匀的厚血膜。自然晾干后,用蒸馏水1滴加于血膜上,待血膜成灰白色时,将水倾去,再用甲醇固定。以稀释的姬氏染液染色30分钟晾干、镜检。或以瑞氏染液染色3~5分钟晾干、镜检。 ...
查看详情将一小滴外周血(采自耳垂或指尖)滴于一载玻片一侧,另取一载玻片为推片,使其一端接触血滴,使血滴向两侧分散,二玻片间保持30°~45°角度,将推片紧靠载玻片沿其表面迅速向前推动,形成分布均匀的血膜,自然干燥后用甲醇1~2滴固定。以稀释的姬氏染液染色30分钟晾干、镜检。或以 瑞氏染液染色3~5分钟晾干、镜检。 ...
查看详情适用于绦虫感染者的虫种鉴定 1.方法 于粪便中挑取绦虫节片,用清水洗净,置于两片玻片之间,轻轻压平,对光观察内部结构,并根据子宫分枝情况鉴定虫种。也可以用注射器从孕节后端正中部插入子宫内徐徐注射炭素墨水或卡红,待子宫分枝显现后记数。 ...
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