的提取是植物分子生物学和基因工程研究的一种基本的技术，至今已有了数种方法。此方法最大的特点是：将SDS同时用作细胞膜的去污剂和蛋白质的变性剂，变性的蛋白质通过离心而不是酚抽提除去，使得整个操作过程变得简单快捷，比较温和，1小时左右就可以获得纯化的植物DNA。用这种方法得到的DNA能直接被限制性内切酶酶解，纯度较高，适用于分子生物学的研究。本实验的目的是掌握DNA提取的原理和方法。 一、材料与方法： 1、植物材料：螺旋藻（Spiruli...

组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、密度、离心力及介质黏度等。同一离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，就能使非均一的悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，从而可分批收集各种亚细胞成分。 一、实验步骤 1.  选取新鲜的嫩菠菜叶，洗净擦干后去除叶梗及粗脉，称30 g 于150 ml...

一、细胞凝集反应 1.  2%鸭血红细胞悬液制备：新鲜鸭血加acd抗凝剂，生理盐水洗5次，每次2 000 r/min，离心5 min，按红细胞压积用生理盐水配成2%鸭血红细胞悬液。 2.  土豆凝集素制备：土豆2克，加10 ml PBS缓冲液，浸泡2 h。 3.  细胞凝集反应 土豆凝集素 1滴 2%鸭血红细胞液  1滴 载...

1.  转染前一天接种呈指数生长的细胞，密度为5×10 5 /10 cm  平板。加10 ml 完全培养液，在开始转染时细胞数应＜10 6 /平板，以留足够供细胞扩增至少2倍的表面积。 2.  用TE缓冲液稀释质粒DNA至1 μg/μl ，4 ℃保存。 3.  将最适量的质粒DNA与500 μl 0.25 mol/l CaCl ...

显微摄影使通过摄影装置,拍摄显微镜视场中被检样品的光学影象的一种技术。 1.  显微摄影装置的安装与调试。 2.  显微镜的光路调整:通过调中，使照明光束与显微镜的光学系统的光轴合一。 3.  装入胶片。 4.  取景聚焦。 5.  暴光： 1/15 s（应先测光:绿灯亮可以正确暴光）。 6.  黑白胶片的冲洗:显影 3 min→停...

细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身药物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受，随着药物浓度的递增，其耐受程度逐渐加强。 一、材料准备 1.  动物选择：根据欲建立的耐药细胞株，选择合适的动物。在实验期间，一般选择同性别动物进行实验，动物体重的选择以雌性约17~21g，雄性约18~22 g 为宜。 2.  瘤株的选择：常见的瘤株均可，应依据研究目的、方向确定实验用瘤株，考虑...

1．固定小鼠 a．用绳子将已麻醉的小鼠俯卧（背朝上）固定在鼠板上，绳子用活结，这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b．用棉花将小鼠的头微微垫高，这样方便切开皮肤。 2．钻孔 a．将小鼠的头部顺着人字缝皮肤切开大约3~5cm，露出小鼠的头骨。 b．找到小鼠的人字缝在其右边1~2mm处做好钻孔的标记。 ...

肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一， 机体免疫功能低下，与肺癌的发生发展密切相关。 一、讨论 NK细胞是一类重要的免疫调节细胞，它具有抗肿瘤、抗感染、免疫调节等作用，它的抗肿瘤机制为： （1）通过其表面的受体，识别肿瘤细胞上的靶结构直接杀伤之，或通过释放可溶性介质来杀伤肿瘤细胞。 （2）NK细胞表面有FcCR受体，它可以与覆盖在肿瘤细胞上的抗体的Fc段相...

TIL 是继LAK 之后的第2 代抗肿瘤效应细胞，是近来实验研究及临床应用的热点之一。目前常规加入IL- 2对TIL 进行培养，但是随着培养时间的延长，TIL 的增殖活性和抗肿瘤活性都有所降低。 一、讨论 用肿瘤特异性T细胞治疗人类恶性肿瘤的一个主要问题是如何获得具有肿瘤特异杀伤力并能在体外扩增足够数量的T淋巴细胞，目前大多数实验室制备TIL是采用机械分离、酶消化、不连续密度梯度离心三步法对实体肿瘤组织进行分离，此法可...

红景天苷不仅具有抗衰老、抗抑郁、抗癌、抗缺氧、保护肝脏、改善心脑血管功能和提高中枢神经系统功能等多种药理作用，还可以起到抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗病毒和增强免疫功能的药理作用。巨噬细胞是机体免疫系统的重要递呈细胞，在特异性和非特异性免疫过程中均发挥着重要的作用。 一、讨论 巨噬细胞免疫调节作用的发挥是通过其抗原提呈、吞噬作用和分泌多种细胞因子而实现的。巨噬细胞发挥其免疫功能的基础是细胞的存活，其存活状态直接影响着其功...