一、操作过程 小鼠腹腔注射10 g/L 淀粉溶液2 ml ↓ 24 h 后，小鼠腹腔注射2%鸡红细胞1 ml ↓ 30 min 后，小鼠脱臼处死，腹腔内注射0.2 ml 肝素注射液，揉动腹部 ↓ 毛细管吸取腹腔液，滴一滴于玻片上，将毛细管平放于液滴上展开液滴，自然干燥 ↓ ...

一、试管法 肝素抗凝血0.1 ml 滴于小试管底部，再加入等量NBT应用液 ↓ 37℃，30分钟（中间摇动一次），再置室温15分钟 ↓ 摇匀，用毛细管取一滴放于玻片一端，做血涂片 ↓ 立即用电吹风吹干，甲醇溶液固定1分钟，10 g/L 沙黄水溶液染色5分钟 ↓ ...

由于卵白素与生物素具有高度亲和力，可形成卵白素-生 物素-过氧化物酶复合物（ABC复合物），ABC 复合物与生物素化二抗结合，最后形成抗 原-抗体-生物素体二抗-ABC复合物。该方法比单PAP法灵敏，背景染色低，受到广大研 究工作者的观迎。 1.  标本固定后，PBS洗涤； 2.  1 %H 2 ...

这种方法可在复合物体系中连接更多的PAP复合物，对抗原可进一步放大，因此灵 敏度更为增强，适用于微量抗原的检测。 1.  标本固定后，PBS洗涤； 2.  1 %H 2 O 2 （或1 %H 2 O ...

PAP 的基本原量是在间接法的基础上，即在加完酶标二抗以后，再加一个 PAP 复合物（过氧化物酶一抗过氧化物酶抗体复合物）。PAP 复合物为由3 个酶分子和2 个抗酶抗体亚单位构成的复环形复合物，其稳定性很强，冲洗时不会脱落。在这种方法 中，PAP 复合物中的抗酶抗体与特异性一抗必须来自同一种属动物。其优点是比间接法 更为灵敏，而且背景染色体。 1.  标本固定后，...

1.  在1. 5 ml 离心管中加入500 ng~2 μg 模板DNA，加水至总体积为34 μl。 2.  在沸水中变性DNA 5 min 置于冰浴5 min，稍加旋离。 3.  按顺序加入下列溶液： （1）10 μl  生物素酰化随即多聚体 （2）5 μl  dNTP/生物素混合物 （3）1 μl  klenow酶（5U） ...

将酶标记在第二抗体上，再与已形成的抗原抗体复合物中的第一抗体反应。目前广 泛应用的PAP法、ABC法是在间接法的原理和技术的基础上发展起来的。 1.  标本固定； 2.  PBS洗涤2×3 分钟； 3.  1 %H 2 O 2 （或1 %H ...

先将酶与抗体结合形成酶标抗体， 然后和相应的抗原反应，使抗原抗体复合物上带有酶分子，再与酶的底物H 2 O 2 —DAB（3’3 —二胺荃联苯胺）发生显色反应，在显微镜下观察，根据颜色产物检测相应抗原。 1.  标本固定； 2.  PBS洗涤2×3 分钟； ...

两个无关个体功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时，由于HLAⅡ类抗原不同，可相互刺激对方的T细胞发生增殖，此外双向混合淋巴细胞培养（two way MLC）；若将其中一方的淋巴细胞先用丝裂酶C处理或射线照射使之细胞中DNA失去复制能力，但仍能刺激另一方淋巴细胞发生转化，称为单向混合淋巴细胞培养（one way MLC）。两个个体间HLA抗原差异程度越大，反应越强烈，可通过细胞数量、形态检查或3H-TdR掺入率检测反应细胞的增殖水平。EB病毒转化的B淋巴细胞表达高水平的HLAⅡ类...

基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合，再用荧光素标记的二 抗与特异性抗体相结合，形成抗原—特异性抗体—标记荧光抗体的复合物。因为在复合物 上带有比直接法更多的荧光标记物，所以比直接法更敏感。 1.  标本固定后，PBS洗涤3×3 分钟； 2.  滴加一抗，37 ℃40 分钟或4 ℃过夜； 3.  PBS洗3×3 分钟； ...