文章资讯

IL-6生物学活性检测实验

1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。 2.  IL-6的生物学活性测定:采用MH60.BSF2细胞增殖法,测定过程IL-2。应用的MH60.BSF2细胞浓度为2×10 5 /ml。 ...

查看详情

生物素酰化探针的检测实验-比色法

1.  用DNA稀释缓冲液,稀释生物素酰化标准DNA,浓度为0、1、2、5、10和20 pg/μl。以同样稀释液处理待测DNA。 2.  对干硝酸纤维素滤膜:每个稀释度取1 μl 点膜,在80℃供干约1 h接步骤4。 3.  对于足龙膜:每个稀释度取1 μl 点膜,晾干后用紫外照射法将DNA交联至膜上。接步骤4或化学发光检测。 4.  用少量体枳AP7.5液沆膜1 min,在密封袋中(...

查看详情

IL-8生物学活性检测实验

一、IL-8的诱生 1.  常规分离PBMC,洗涤后,调细胞浓度为5×10 6 /ml。 2.  将细胞接种于24孔细胞培养板,每孔0.5 ml。 3.  加诱生剂LPS(20 ug/ml),每孔0.5 ml,37度,5%CO 2 孵育48 h。 4.  离心收集...

查看详情

IL-10生物学活性检测实验

D36细胞悬液制备① ↓ 接种细胞于96孔培养板② ↓ 加待测样品和标准品③ ↓ 加3H-TdR④ ↓ 收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤ ↓ 绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥ 注意事项 ...

查看详情

淋巴细胞转化试验

T、B细胞在抗原或有丝分裂原的刺激下可转化为淋巴母细胞,借此可了解淋巴细胞对异物刺激的反应性。 1. 取肝素抗凝血1~2毫升,用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞; 2. 调整细胞浓度为2×106/毫升; 3. 加PHA,使终浓度为1%; 4. 5%二氧化碳培养箱培养48~72小时; 5. 取出弃上清,生理盐水洗涤1次(1000rpm/min,10分钟),弃上清; ...

查看详情

肿瘤蛋白免疫预防性实验

一般肿瘤蛋白疫苗首次免疫剂量10ug/只小鼠, 与相应佐剂混匀, 在背部皮下注射, 第2 次免疫间隔2 周, 同样加佐剂在皮下注射;第3 次免疫间隔2 周, 同样加佐剂在皮下注射;第3 次免疫后2 周, 用ELISA 检测其血清效价,当效价达到要求时;在接种肿瘤细胞前3 天,于腹腔或尾静脉加强注射20ug /只。 ...

查看详情

链亲和素-生物素结合物免疫荧光标记实验

1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2.  待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 3.  稀释的第一杭体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min(每一载玻片上加40~50 μl 抗体,应能盖住切片)。 4.  用与泵相连的巴斯德吸管,在切片的一端吸去玻片上的P...

查看详情

组织切片的免疫金标记

利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质,与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外,胶体金还可与其它多种生物大分子,如SPA、PHA、ConA等结合。 1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2.  待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 3.  稀释的第一杭体于...

查看详情

组织切片的免疫过氧化物酶标记实验

1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2.  待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 3.  室温下在含0.25%过氧化氢的PBS中温育30 min,以PBS洗3次。 4.  稀释的第一杭体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min(每一载玻片上加40~50...

查看详情

血清学选克隆新抗原或新基因

一、E.coli/phage裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes(NC)浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中,室温下水平摇动30 分钟,取出NC 并使膜沥干。 3. 用50ml TBST 溶液洗膜3 次,每次10 分钟。 ...

查看详情

显示 1471 - 10 (共10篇)