1.  1.5 ml  对数生长期细菌细胞。 2.  离心，12 000 rpm，1-2 min。 3.  沉淀。 4.  溶于590 ul SE缓冲液中混匀+10 ul 溶菌酶37℃，1 hr。 5.  离心，12 000 rpm，8~10 min。 6.  沉淀。 7.  溶于100 μL，0.5 μl 蛋白酶K，混匀...

1.  酵母在YPD（或选择性）培养基中剧烈振荡下培养至对数中期。离心，弃上清，市售酵母糕可以用来代替培养细胞。 2.  在旋涡混合器上振荡细胞沉淀，使其形成粘稠的细胞糊，必要时，加入最少量的冰水使细胞糊能够倒出或舀出，如果使用酵母糕，用等体积的细胞和水混合使之形成粘稠的细胞糊。在后续步骤中细胞糊的操作应在冰浴中进行。 3.  拔出60 ml 注射器的活塞，用塞子塞住底部或者用Parafilm 膜包紧，加入50...

在浓氯化钠（1-2 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小，在稀氯化钠（0.14 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。   将抽提得的核蛋白用SDS（十二烷基硫酸钠）处理，DNA或（RNA）即与蛋白质分开，可用氯仿―异戊醇将蛋白质沉淀除去，而DNA则溶解于溶液中。向溶液中加入适量乙醇，DNA即析出。   为了防止DNA或（...

1.  培养并收集酵母菌细胞，在酵母消解酶缓冲液重悬菌体沉淀之前，测定压紧细胞的体积，以下所有步骤均在4℃进行。 2.  用1体积的玻璃珠破菌缓冲液重悬细胞。 3.  用2体积的玻璃珠破菌缓沖液与细胞混合，加4体积冰冷的酸洗玻璃珠。 4a.  当压紧的细胞休积＜10 ml，将细胞悬液转移至合适大小的带螺口的离心管中（悬液占离心管≤60%~70%的容积），于4℃以最大速度下振荡30~6...

由于辐射能使空气中的氧电离成［O］，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成过氧化氢（H2O2），O3和H2O2均有杀菌作用。紫外线穿透力不大，所以，只适用于无菌室、接种箱、手术室内的空气及物体表面的灭菌。紫外线灯距照射物以不超过1.2 m 为宜。 1.  单用紫外线照射 （1）在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关，照射30分钟，将开关关闭。 （2）将牛肉膏蛋白胨平皿盖打开15分钟，然后盖...

将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期，各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件不同而异。   比浊法是根据细菌悬液细胞数与混浊度成正比，与透光度成反比关系，利用光电比色计测定细胞悬液的光密度(即OD值)，用于表示该菌在本实验条件下的相对生长量。   实验设正常生长、加酸...

用左眼观察镜下标本，右眼看镜外并进行绘图。 一般多用铅笔绘制的点和线构成轮廓图（点线图），不用衬阴画法。部分（如疟原虫）可用红，蓝色笔绘制。 绘图应根据标本特征，要准确，真实，具备必要特点，并能反映标本之间大小比例。 图面要求整洁，图中的各部分应注字（标明结构名称），注字一般应在右侧，注字应清楚，准确。引出的线条要尽量作成平行线。 一.  成虫 1. 液浸大体标本（肉眼观察，操作）： ...

在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。 1.  首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。 2.  放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。 ...

1.  建立一个标准100 μl 反应体系，用10 μl，10×地高辛·11-dUTP/dTTP贮液，DNA酶Ⅰ酶量不变，15℃温育2 h。 2.  取小份在微型胶中进行电泳以检测探针大小。 3.  继续反应直到获得大小合适的DNA探针。 4.  加入2 μl 0.5mol/l EDTA和1 μl 10%SDS，68℃加热10 min 以终止反应。 5. ...

1. 染色：HE 2. 肉眼观察： 标本为气管横切面，腔面有一薄层紫蓝色组织，此即假复层纤毛柱状上皮。注意勿将切片中一"C形"的着蓝色的软骨环当作上皮。 3. 低倍镜观察： 假复层纤毛柱状上皮的细胞高矮不等，故相应的细胞核高低错落、形似复层。此种上皮的基膜较明显。选择杯状细胞较多的部位，转高倍镜观察。 4. 高倍镜观察： ...