一般肿瘤蛋白疫苗首次免疫剂量10ug/只小鼠, 与相应佐剂混匀, 在背部皮下注射, 第2 次免疫间隔2 周, 同样加佐剂在皮下注射；第3 次免疫间隔2 周, 同样加佐剂在皮下注射；第3 次免疫后2 周, 用ELISA 检测其血清效价，当效价达到要求时；在接种肿瘤细胞前3 天,于腹腔或尾静脉加强注射20ug /只。 ...

T、B细胞在抗原或有丝分裂原的刺激下可转化为淋巴母细胞，借此可了解淋巴细胞对异物刺激的反应性。 1. 取肝素抗凝血1～2毫升，用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞； 2. 调整细胞浓度为2×106/毫升； 3. 加PHA，使终浓度为1%； 4. 5%二氧化碳培养箱培养48～72小时； 5. 取出弃上清，生理盐水洗涤1次（1000rpm/min，10分钟），弃上清； ...

D36细胞悬液制备① ↓ 接种细胞于96孔培养板② ↓ 加待测样品和标准品③ ↓ 加3H-TdR④ ↓ 收集细胞，测定3H-TdR掺入量⑤ ↓ 绘制标准曲线，计算待测样品的IL-10的活性单位⑥ 注意事项 ...

一、IL-8的诱生 1.  常规分离PBMC，洗涤后，调细胞浓度为5×10 6 /ml。 2.  将细胞接种于24孔细胞培养板，每孔0.5 ml。 3.  加诱生剂LPS（20 ug/ml），每孔0.5 ml，37度，5%CO 2 孵育48 h。 4.  离心收集...

1.  用DNA稀释缓冲液，稀释生物素酰化标准DNA，浓度为0、1、2、5、10和20 pg/μl。以同样稀释液处理待测DNA。 2.  对干硝酸纤维素滤膜：每个稀释度取1 μl 点膜，在80℃供干约1 h接步骤4。 3.  对于足龙膜：每个稀释度取1 μl 点膜，晾干后用紫外照射法将DNA交联至膜上。接步骤4或化学发光检测。 4.  用少量体枳AP7.5液沆膜1 min，在密封袋中（...

1.  IL-6的诱生：诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。 2.  IL-6的生物学活性测定：采用MH60.BSF2细胞增殖法，测定过程IL-2。应用的MH60.BSF2细胞浓度为2×10 5 /ml。 ...

一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备① ↓ 接种细胞于96孔培养板② ↓ 加待测样品和标准品③ ↓ 加3H-TdR④ ↓ 收集细胞，测定3H-TdR掺入量⑤ ↓ 绘制标准曲线，计算待测样品的IL...

一、人外周血T细胞分泌IL-2的诱生 1.  人PBMC分离：采用常规淋巴细胞分层液浓度梯度离心法分离PBMC，用10%FCS-RPMI-1640培养液调整细胞浓度为 2.  加样：接种细胞悬液于24孔培养板，每孔0.51 ml，每孔再加PHA 0.5 ml，37度，5%CO 2 孵育48小时。 3.  回收上清：吸出细胞培养上清，1200...

IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时，IL-1可刺激小鼠胸腺细胞增殖。进一步通过3H-TdR掺入法或染料摄入法判定小鼠胸腺细胞增殖量，推定IL-1的生物学活性。通过检测IL-1的生物学活性，可了解单核-巨噬细胞等的功能。 1.  小鼠巨噬细胞产生IL-1的诱导 （1）常规收集小鼠腹腔巨噬细胞，10%FCS-IMDM培养液悬浮细胞2×10 6 /ml，接种于24孔培养板，0.5 ml...

一、材料准备 1.  斑蟊浸液制备：斑蟊以95%乙醇溶液制成10%酊剂，室温下浸泡2周后使用。 2.  人巨噬细胞的获取：取滤纸片蘸斑蟊酊，置于一侧前臂皮肤上，在滤纸片上盖一塑料片，再以清洁纱布固定4~5小时，取下滤纸片，再用塑料瓶盖将局部罩上，以防形成的水疱破裂，48小时即可形成完整的水疱。 二、实验步骤 取水疱渗出液0.5 ml，加5%鸡红细胞悬液...