利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质，与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外，胶体金还可与其它多种生物大分子，如SPA、PHA、ConA等结合。 1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2.  待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3.  稀释的第一杭体于...

1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2.  待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3.  稀释的第一杭体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min（每一载玻片上加40~50 μl 抗体，应能盖住切片）。 4.  用与泵相连的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的P...

一般肿瘤蛋白疫苗首次免疫剂量10ug/只小鼠, 与相应佐剂混匀, 在背部皮下注射, 第2 次免疫间隔2 周, 同样加佐剂在皮下注射；第3 次免疫间隔2 周, 同样加佐剂在皮下注射；第3 次免疫后2 周, 用ELISA 检测其血清效价，当效价达到要求时；在接种肿瘤细胞前3 天,于腹腔或尾静脉加强注射20ug /只。 ...

T、B细胞在抗原或有丝分裂原的刺激下可转化为淋巴母细胞，借此可了解淋巴细胞对异物刺激的反应性。 1. 取肝素抗凝血1～2毫升，用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞； 2. 调整细胞浓度为2×106/毫升； 3. 加PHA，使终浓度为1%； 4. 5%二氧化碳培养箱培养48～72小时； 5. 取出弃上清，生理盐水洗涤1次（1000rpm/min，10分钟），弃上清； ...

D36细胞悬液制备① ↓ 接种细胞于96孔培养板② ↓ 加待测样品和标准品③ ↓ 加3H-TdR④ ↓ 收集细胞，测定3H-TdR掺入量⑤ ↓ 绘制标准曲线，计算待测样品的IL-10的活性单位⑥ 注意事项 ...

一、IL-8的诱生 1.  常规分离PBMC，洗涤后，调细胞浓度为5×10 6 /ml。 2.  将细胞接种于24孔细胞培养板，每孔0.5 ml。 3.  加诱生剂LPS（20 ug/ml），每孔0.5 ml，37度，5%CO 2 孵育48 h。 4.  离心收集...

1.  用DNA稀释缓冲液，稀释生物素酰化标准DNA，浓度为0、1、2、5、10和20 pg/μl。以同样稀释液处理待测DNA。 2.  对干硝酸纤维素滤膜：每个稀释度取1 μl 点膜，在80℃供干约1 h接步骤4。 3.  对于足龙膜：每个稀释度取1 μl 点膜，晾干后用紫外照射法将DNA交联至膜上。接步骤4或化学发光检测。 4.  用少量体枳AP7.5液沆膜1 min，在密封袋中（...

1.  IL-6的诱生：诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。 2.  IL-6的生物学活性测定：采用MH60.BSF2细胞增殖法，测定过程IL-2。应用的MH60.BSF2细胞浓度为2×10 5 /ml。 ...

一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备① ↓ 接种细胞于96孔培养板② ↓ 加待测样品和标准品③ ↓ 加3H-TdR④ ↓ 收集细胞，测定3H-TdR掺入量⑤ ↓ 绘制标准曲线，计算待测样品的IL...

一、人外周血T细胞分泌IL-2的诱生 1.  人PBMC分离：采用常规淋巴细胞分层液浓度梯度离心法分离PBMC，用10%FCS-RPMI-1640培养液调整细胞浓度为 2.  加样：接种细胞悬液于24孔培养板，每孔0.51 ml，每孔再加PHA 0.5 ml，37度，5%CO 2 孵育48小时。 3.  回收上清：吸出细胞培养上清，1200...