两个无关个体功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时，由于HLAⅡ类抗原不同，可相互刺激对方的T细胞发生增殖，此外双向混合淋巴细胞培养（two way MLC）；若将其中一方的淋巴细胞先用丝裂酶C处理或射线照射使之细胞中DNA失去复制能力，但仍能刺激另一方淋巴细胞发生转化，称为单向混合淋巴细胞培养（one way MLC）。两个个体间HLA抗原差异程度越大，反应越强烈，可通过细胞数量、形态检查或3H-TdR掺入率检测反应细胞的增殖水平。EB病毒转化的B淋巴细胞表达高水平的HLAⅡ类...

基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合，再用荧光素标记的二 抗与特异性抗体相结合，形成抗原—特异性抗体—标记荧光抗体的复合物。因为在复合物 上带有比直接法更多的荧光标记物，所以比直接法更敏感。 1.  标本固定后，PBS洗涤3×3 分钟； 2.  滴加一抗，37 ℃40 分钟或4 ℃过夜； 3.  PBS洗3×3 分钟； ...

直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应，形成抗原—荧 光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度，确定相应抗原的存在与否及其所在 部位。 1.  标本经固定后，PBS洗涤3×3 分钟； 2.  加荧光素标记的抗体，湿盒内37 ℃孵育50 分钟； 3.  PBS洗涤3×3 分钟； 4.  0.1 %...

用放射性核素标记靶细胞，当靶细胞受到破坏时，放射性核素被释放出来，通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性，即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。 一、材料准备 1.  靶细胞制备 （1）取传代培养24~48小时对数生长期的K562，用RPMI-1640培养液洗涤2次，用10...

1.  混合以下物质于100 μl 反应体积： （1）10 μl  10×大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ缓冲液 （2）10 μl  0.5 mmol/l 3dNTP混合液 （3）10 μl  0.5 mmol/l 生物素-11-dNTP贮存液 （4）10 μl  0.5 mmol/l 2-ME （5）2 μg  DNA ...

一、白血球的噬菌作用 1.  试验前3~6小时。将无菌肉汤2~3毫升注射入小白鼠腹腔内引起大量白血球聚集于小白鼠腹腔内。 2. 将1ml甲型链球菌菌液注入小白鼠腹腔。 3. 注射后用毛细吸管轻轻刺入小白鼠腹腔吸取腹腔液。经5ˊ、10ˊ、20ˊ、40ˊ后，分别取腹腔液滴于玻片上制成涂片，经自然干燥后，用稀释的美蓝液染色一分钟后镜检。 ...

唾液里含有溶菌酶，能溶解革兰氏阳性菌，是机体非特异性免疫因素之一。溶菌酶对于革兰氏阳性菌的作用在于裂解细胞壁中的乙酰胞壁酸和乙酰葡糖胺之间的连接，可导致细菌死亡。测定体液中溶菌酶含量的变化，认为可以反映非特异性免疫功能一个方面。 1.  试验前一天，将细菌移种普通斜面37℃培养24小时，用生理盐水洗下菌苔稀释至适当浓度（722型分光光度计上波长450纳米光密度0.4）。 2.  唾液流入无菌平皿内，以备用。 ...

1.  取无菌小试管2支，分别注明1、2号。 2.  用吸管取新鲜无菌兔血清0.5毫升，加入第1管内。 3.  用另一支吸管吸取无菌生理盐水0.5毫升，加入第二管内。 4.  再用吸管吸取伤寒杆菌培养液，分别加入1及2管中各0.1毫升。加菌液时，防止菌液接触管壁以免污染管壁，造成结果的错误。然后振荡两支试管使之均匀混合，置37℃水浴箱中。 ...

1. 获得的菌液经2500转/分，20分钟离心洗涤1~2次，将沉淀配成2倍于湿菌浓度的浓菌液。 2. 用超声波发生器中频（约相当于12000 cps）处理20分钟。 3. 处理液经3000转/分，离心30分钟，吸取上清液即为脂多糖抗原。置4℃冰箱保存备用。 ...

原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中，冷却，离心混合液可分为水溶液层，内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。 1. 细菌浓悬液用盐水经2500转/分，20分钟离心洗涤一次。 2. 将沉淀的菌混匀于蒸馏水中，放66℃水浴，然后滴加等量的90%热酚溶液（预热至66℃），边加边摇，而后在66℃水浴中搅拌25分钟 ...