直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应，形成抗原—荧 光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度，确定相应抗原的存在与否及其所在 部位。 1.  标本经固定后，PBS洗涤3×3 分钟； 2.  加荧光素标记的抗体，湿盒内37 ℃孵育50 分钟； 3.  PBS洗涤3×3 分钟； 4.  0.1 %...

用放射性核素标记靶细胞，当靶细胞受到破坏时，放射性核素被释放出来，通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性，即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。 一、材料准备 1.  靶细胞制备 （1）取传代培养24~48小时对数生长期的K562，用RPMI-1640培养液洗涤2次，用10...

1.  混合以下物质于100 μl 反应体积： （1）10 μl  10×大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ缓冲液 （2）10 μl  0.5 mmol/l 3dNTP混合液 （3）10 μl  0.5 mmol/l 生物素-11-dNTP贮存液 （4）10 μl  0.5 mmol/l 2-ME （5）2 μg  DNA ...

一、白血球的噬菌作用 1.  试验前3~6小时。将无菌肉汤2~3毫升注射入小白鼠腹腔内引起大量白血球聚集于小白鼠腹腔内。 2. 将1ml甲型链球菌菌液注入小白鼠腹腔。 3. 注射后用毛细吸管轻轻刺入小白鼠腹腔吸取腹腔液。经5ˊ、10ˊ、20ˊ、40ˊ后，分别取腹腔液滴于玻片上制成涂片，经自然干燥后，用稀释的美蓝液染色一分钟后镜检。 ...

唾液里含有溶菌酶，能溶解革兰氏阳性菌，是机体非特异性免疫因素之一。溶菌酶对于革兰氏阳性菌的作用在于裂解细胞壁中的乙酰胞壁酸和乙酰葡糖胺之间的连接，可导致细菌死亡。测定体液中溶菌酶含量的变化，认为可以反映非特异性免疫功能一个方面。 1.  试验前一天，将细菌移种普通斜面37℃培养24小时，用生理盐水洗下菌苔稀释至适当浓度（722型分光光度计上波长450纳米光密度0.4）。 2.  唾液流入无菌平皿内，以备用。 ...

1.  取无菌小试管2支，分别注明1、2号。 2.  用吸管取新鲜无菌兔血清0.5毫升，加入第1管内。 3.  用另一支吸管吸取无菌生理盐水0.5毫升，加入第二管内。 4.  再用吸管吸取伤寒杆菌培养液，分别加入1及2管中各0.1毫升。加菌液时，防止菌液接触管壁以免污染管壁，造成结果的错误。然后振荡两支试管使之均匀混合，置37℃水浴箱中。 ...

1. 获得的菌液经2500转/分，20分钟离心洗涤1~2次，将沉淀配成2倍于湿菌浓度的浓菌液。 2. 用超声波发生器中频（约相当于12000 cps）处理20分钟。 3. 处理液经3000转/分，离心30分钟，吸取上清液即为脂多糖抗原。置4℃冰箱保存备用。 ...

原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中，冷却，离心混合液可分为水溶液层，内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。 1. 细菌浓悬液用盐水经2500转/分，20分钟离心洗涤一次。 2. 将沉淀的菌混匀于蒸馏水中，放66℃水浴，然后滴加等量的90%热酚溶液（预热至66℃），边加边摇，而后在66℃水浴中搅拌25分钟 ...

1.  重复基本方案中的步骤1~5。 2.  在高质量的低融点胶中分离久DNA（0.7%，TAE缓冲液），切下体积尽可能小的所需DNA条带（20~50 μl ）至小离心管中。 3.  在70℃融化低融点胶10 min 以上，每个连接反应在不同的试管中进行。 4.  在的体积中混合含适当DNA的凝胶块（需要时用水补足）37℃放置数分钟。 5.  加入11...

巨噬细胞具有吞噬大颗粒异物的特性，通常选用鸡红细胞作为吞噬颗粒，将其注入小鼠腹腔中，腹腔中巨噬细胞则将鸡红细胞吞入。取小鼠腹腔液涂片、染色后可见鸡红细胞被吞噬的现象，计数100个吞噬细胞中吞噬鸡红细胞的细胞数可判断其吞噬功能。 镜下可见吞噬细胞细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞胞浆呈红色，而核则染成蓝色（鸡红细胞有细胞核）。计数100个吞噬细胞，并计算吞噬阳性细胞的百分率。 1. 试验前3天，于小白鼠腹腔内注射6%可溶性淀粉肉汤lml。 ...