1.  重复基本方案中的步骤1~5。 2.  在高质量的低融点胶中分离久DNA（0.7%，TAE缓冲液），切下体积尽可能小的所需DNA条带（20~50 μl ）至小离心管中。 3.  在70℃融化低融点胶10 min 以上，每个连接反应在不同的试管中进行。 4.  在的体积中混合含适当DNA的凝胶块（需要时用水补足）37℃放置数分钟。 5.  加入11...

巨噬细胞具有吞噬大颗粒异物的特性，通常选用鸡红细胞作为吞噬颗粒，将其注入小鼠腹腔中，腹腔中巨噬细胞则将鸡红细胞吞入。取小鼠腹腔液涂片、染色后可见鸡红细胞被吞噬的现象，计数100个吞噬细胞中吞噬鸡红细胞的细胞数可判断其吞噬功能。 镜下可见吞噬细胞细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞胞浆呈红色，而核则染成蓝色（鸡红细胞有细胞核）。计数100个吞噬细胞，并计算吞噬阳性细胞的百分率。 1. 试验前3天，于小白鼠腹腔内注射6%可溶性淀粉肉汤lml。 ...

1.  弗氏佐剂的制备 将羊毛脂与石蜡油按1：5比例混合，高压灭菌。 2.  人血清—弗氏完全的制备 将灭菌佐剂一份置研钵中，边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液，使成油色水乳剂，研磨要充分，使乳剂滴入冰水中不扩散。 3.  免疫动物 可采用一次性免疫法，即将抗原与佐剂制成的乳剂分多个点兔背部皮肤，也可注入足底2~4针各0.45毫升，总量...

1.  抗原包被 取洁净的聚苯乙烯微量反应板，于每孔内加伤寒抗原0.1毫升（用包被缓冲液稀释，蛋白含量10微克/毫升），置37℃1小时，弃抗原液，用洗涤液3次每次3分钟。 2.  加待测血清 于每孔内分别加不同稀释度（如1：5，1：10，1：20…1：80）的待测血清，PBS空白对照，阴性对照血清，阳性对照血清各0.1毫升。置37℃30分钟，洗涤3次。 3.  加酶联A蛋白...

利用凝集吸收试验可制备单价因子血清，以进行细菌抗原结构的分析及鉴定菌型。 1.  1/10稀释伤寒杆菌免疫血清分别与肠炎杆菌与伤寒杆菌进行玻片凝集，可见伤寒免疫血清与两种菌均有凝集，说明二菌具有共同抗原结构，故发生交叉凝集反应。 2.  将一定量的肠炎杆菌菌液加入1：10稀释伤寒杆菌免疫血清中，放37℃水浴箱中作用2小时，取出后离心沉淀，吸取上清夜，弃去沉淀。 3.  将吸收过的上清夜与稀释肠炎杆菌菌...

金黄色葡萄球菌细胞壁成分中的A蛋白能与人及多种哺乳动物（猪、兔、羊、鼠等）血清中IgG类抗体 的Fc段结合。IgG的Fe段与SpA结合后，两个Fab段暴露在葡萄球体表面，仍保持其抗体活性和特异性当其与特异性抗原相遇时，也出现特异凝集现象。在以凝集反应中，金黄色葡萄球菌菌体成了IgG抗体的载体,称为协同凝集反应.本反应也可用于检测微量抗原。 1.  10%葡萄球菌菌悬液的制备：CoWan1株葡萄球菌接种于柯氏瓶，37℃培养18-24小时，用PBS洗下菌苔...

若使可溶性抗原与相应抗体先混合，充分作用后再加入有关的免疫微球，因抗体已被可溶性抗原结合，不再出现免疫微球的被动凝集现象，叫间接凝集抑制试验，临床化验检查中常用的免疫妊娠试验就是一种间接凝集抑制试验。 妊娠试验 孕妇尿中绒毛膜促性腺激素的含量比正常尿高。因此当往尿中加入抗绒毛膜促性腺激素抗体时，由于发生抗原抗体反应的结果，抗体被消耗，此时再往尿中加入胶乳抗原（吸附有人类绒毛膜促性腺激素的聚苯乙烯乳胶颗粒）。 ...

间接血球凝集试验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面，此时红血球即称为“致敏红血球”。这种致敏的红血球具有细菌的抗原性，与相应的抗血清相遇可产生凝集现象。间接血凝抗原的制备可用加碱或加热的方法使菌体中的多糖物质浸出，去除类脂以免干扰红血球的吸附作用。但如系蛋白质时则用来吸附的红血球需先用鞣酸予以处理。 1.  “O”抗原的制备： 将每毫升100亿的伤寒杆菌“O”菌悬液，置100℃...

一、操作步骤 1.  取洁净小试管14只分两排排列于试管架上，每排7只依次用蜡笔注明号码，于每管中分别加入0.5毫升生理盐水。 2.  在第1排1管中加入1：10稀释伤寒H血清0.5毫升，于管内连续吹吸3次，使血清与盐水充分混合，而后吸出0.5毫升注入第2管，同样予以混匀后吸出0.5毫升注入第3管。依次类推，稀释到第6管，自第6管吸出0.5毫升弃去。此时，自第1管至第6管的血清稀释倍数为1：20，1：40...

1.  取清洁玻片一张，用蜡笔划为三格，并注明号码。无菌操作下，用接种环于1、2格内加1：10稀释伤寒杆菌诊断血清1-2滴，第三格加1~2滴生理盐水。 2.  无菌操作下，用接种环取伤寒杆菌培养物少许，混于第三格中，再混于第一格中（不能先混第一格再混第三格，因为这样将使诊断血清混入盐水而影响对照结果），将细菌与盐水或血清混合均匀使呈乳状液。此时取菌量不可过多，使悬液呈轻度乳浊即可。 3.  同法取枯草杆菌培养物少许，...