1.  紫外灯下从胶上切下目的片段，放入一Epphendof管中。 2.  离心管在－20℃冷却5~10分钟。 3.  将微量柱下套上一Epphendof管，将冷却的胶条装进微量柱中，4℃12 000 rpm 离心10分钟。 4.  弃微量柱，用酚/氯仿、氯仿抽提Epphendof管中液体各一次。 5.  1/10体积乙酸钠+2体积无水乙醇沉淀2小时。 ...

正常情况下，大肠艾希氏菌不致病，而且还能合成维生素B和K，生产大肠菌素，对机体有利。但当机体抵抗力下降或大肠艾希氏菌侵入肠外组织或器官时，可作为条件性致病菌而引起肠道外感染。有些血清型可引起肠道感染，已知的引起致病性大肠艾希氏菌有四类，即产肠毒素大肠艾希氏菌、出血性大肠艾希氏菌、肠道侵袭性大肠艾希氏菌和肠道致病性大肠艾希氏菌，后者主要引起新生儿的腹泻。带菌的牛和猪是传播本菌引起食物中毒的重要原因，人的带菌亦可污染食品，引起中毒。 一、增菌 ...

真菌的基本构造是什么？ 真菌菌落有几型各有何特点？ 浅部真菌病的临床标本怎样镜检？ 1.  标本的采集 采集足癣标本时，用小刀刮取病损边缘部皮屑，若是足趾间有病损，应选择潮湿或干裂皮屑。夹取发癣标本时，用小镊子选拔病损部位的断残头发。用过的器械应立即用火焰灭菌。 2.  标本的处理 将病发或皮屑放于载玻片上，滴2～3滴NaOH或KOH溶液，...

活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例，有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据。由于乳酸菌对营养有复杂的要求，生长需要碳水化合物、氨基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等，一般的肉汤培养基难以满足其要求。测定乳酸菌时必须尽量将试样中所有活的乳酸菌检测出来。要提高检出率，关键是选用特定良好的培养基。采用稀释平板菌落计数法，检测酸奶中的各种乳酸菌可获得满意的结果。 一、样品稀释 先将酸奶样品搅拌均匀...

酵母加入面粉和水的混和合物中后,在28 ℃左右的温度下,利用面粉中含有少量单糖与蔗糖开始生长繁殖,在生长繁殖的同时,面粉中的β-淀粉酶能将面粉中的淀粉转化为麦芽糖。                                     β-淀粉酶 2(C6H1005)+2nH20────→n(C12H22011)        淀粉                                              麦芽糖 麦芽糖的增加,为酵母菌进一步生长发...

单细胞蛋白是通过培养单细胞微生物获得的菌体蛋白质。酵母菌、丝状真菌、微型藻类及非病源细菌等单细胞微生物均可用于生产单细胞蛋白，其中酵母菌是生产单细胞蛋白的主要单细胞微生物。多种原料可用于生产单细胞蛋白，如秸秆、薯干、石油、甲烷等，特别是一些工业废水、废渣可用来生产单细胞蛋白饲料，废物利用有利于环保。 一、菌种活化 用接种环将啤酒酵母菌种接入盛有35mL菌种活化培养基的三角瓶中，30 ℃摇床17～19 h。 ...

大肠杆菌的许多菌株在穿刺瓶中可以保存数年，在-70 °C则可以无限期保存。 一、穿刺保存 1.  在一个耐高压的带有橡皮塞或Teflon盖的气密性小瓶中加人2/3体积穿刺培养基。 2.  挑取一个单菌落，反复将接种环深刺人琼脂中。 3.  拧松盖子，于37 °C培养（8~12 h ）直到在穿刺孔迹中的细菌生长至可见的雾状。 ...

为了更好地分析单菌落，菌落可以从一个平板转移到另一个平板，而菌落原有的分布形式保持不变。 1.  用金属圈将一块无菌的绒布套在影印模具上。无菌的滤纸块或一次性的影印平板均可使用。 2.  标记主平板的方向，然后将该平板向下轻轻地压在绒布上。 3.  按主平板的方向轻轻地将一个新鲜的平板压在有菌落痕迹的绒布上，如有必要重复操作。每一块绒布可以影印10 个平板以上。 ...

通过铺平板分离单个菌落 1.  吸取0.05~1 ml培养物至一只干的平板上。 2.  用涂布棒作圆周运动将培养液涂布均匀，或用涂布棒的边缘在平板的表面画光栅图案（一系列平行线），然后转动平板并与已涂布的平行线成直角重复涂布。 3.  于37 °C培养箱内平板盖微开至平板完全晾干。盖上平板盖，培养直至长出单菌落。 ...

本方法特别适合于PCR片段的回收，具有纯度高、操作简洁等特点，经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程，PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来，成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收效率。下表为不同长度的DNA片断，在室温条件下，用此纯化系统直接纯化时，各自相应的回收率。 一、从琼脂糖介质中纯化DNA片断 1.  用低熔...