细菌V.P实验
1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将培养的细菌做好标记。 2. 接种培养 以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中，空白对照管不接种，置37℃恒温箱中，培养24～48h。 3. 观察记录 取出以上试管，振荡2min。另取5支空试管相应标记菌名，分别加入3～5ml以上对应管中的培养液，再加入40％NaOH溶液10～20滴，并...
查看详情细菌糖发酵实验
1. 试管标记 取分别装有不同糖类（如葡萄糖、蔗糖和乳糖等）发酵培养液的试管，根据需要培养的细菌做好标记（如大肠埃希菌、产气肠杆菌、普通变形菌等和空白对照）。 2. 接种培养 以无菌操作分别接种少量菌苔至以上各相应试管中，空白对照中不接种，置37℃恒温箱中培养，分别在培养24h、48h和72h观察结果。 3. 观察记录 培养后各发酵管与空白对照相比，若接种培养液保持原有颜色，其反应结果为阴性，表明该菌不能利用该种糖，记录用...
查看详情DNA片段的回收实验-常规方法
1. PAGE电泳，如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断，如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。 2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中，用玻棒将凝胶捣碎，用150 ul 洗脱缓冲液II将玻棒上的凝胶洗至Eppendorf管中。 3. 振荡后置于37℃3~5小时或过夜。 4. 振荡后离心（10 000 g，10 min），取上清液，并再用200 ul 洗脱缓...
查看详情细菌鉴定实验
玻片凝集反应（slide agglutirlation）是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质（如细菌，立克次体，钩端螺旋体等）混合，在有适当电解质存在的条件下，如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物，即为阳性：如两者不对应便无凝集物出现，即为阴性。此法属定性试验，主要用于细菌鉴定和分型等。 1. 取载玻片一张平置实验台上，用特种铅笔或记号笔划分为三格，并标明1，2，3。 2. 用1 ml 吸管吸取生理盐水1~2 滴于...
查看详情菌种保藏实验-冷冻干燥保藏法
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征通过冷冻干燥使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。 此法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，即使对一些很难保存的致病菌，如脑膜炎球菌与淋病球菌等亦能保存。适用于菌种长...
查看详情菌种保藏实验-液氮冷冻保藏法
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征通过低温使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。 此法除适宜于一般微生物的保藏外，对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物如支原体、衣原体、氢细菌、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞均可长期保藏，而且性状不变异。缺点是...
查看详情菌种保藏实验-沙土保藏法
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征干燥菌种使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。 此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌、放线菌，因此在抗生素工业生产中应用最广，效果亦好，可保存2年左右，但应用于营养细胞效果不佳。 一、取...
查看详情菌种保藏实验-液体石蜡保藏法
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。 此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1-2年，一般无芽孢细菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌，在37℃温...
查看详情菌种保藏实验-滤纸保藏法
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。 细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。 ...
查看详情菌种保藏实验-斜面低温保藏法
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征创造一个低温环境使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。 此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学...
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