微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征创造一个低温环境使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。 此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学...

人类巨细胞病毒（HCMV）感染细胞后，经短期培养48～72 小时，可产生早期蛋白抗原（HCMV-EA），应用已知抗HCMV-EA的单克隆抗体（McAb-20 K）与之结合，再加入荧光素（FITC）标记羊抗人IgG 荧光抗体，在荧光镜下检查，可见细胞核内或胞浆内有黄绿色荧光。 将已经处理的待检尿液混合于人胚肺纤维母细胞（HEL）中，然后用4 号针头滴加于印有小孔的灭菌玻片上，放CO 2 孵育箱中，37 ℃短期培养...

用带EB 病毒衣壳抗原的类淋巴细胞作抗原靶细胞，可与病人血清中的VCA--IgA 抗体结合，形成抗原抗体复合物，再与酶标抗人IgA 抗体结合，加入底物后酶催化底物变为有色产物，使靶细胞着色，产物的量与病人血清中的抗体量直接相关，故可根据颜色反应的深浅对抗体定量分析。 此法简便敏感，适于对人群普查鼻咽癌，有助于早期诊断鼻咽癌。 有助于诊断和鉴别诊断鼻咽癌：用VCA-IgA 试验检测鼻咽癌患者，抗体阳性率在90% 以上，抗体滴度1...

1.  紫外灯下从胶上切下目的片段，放入一Epphendof管中。 2.  离心1 min，加入500 ul TE，200 ul 酚/氯仿混匀。 3.  离心管放入液氮中10~15 min，再室温放置，反复冻融。 4.  用酚/氯仿、氯仿抽提Epphendof管中液体各一次。 5.  1/10体积乙酸钠+2体积无水乙醇沉淀2小时。 6.  70%...

将抗μ链球蛋白（豚鼠抗兔IgM 抗体）非特异地吸附在固相上，加入待检乙脑病人血清，血清中的IgM能和抗μ链球蛋白结合。当再加入定量特异性日本乙脑病（JBEV）抗原和酶标记的相应抗体（兔抗IBEV IgG）时，病人血清抗体再与IBEV抗原和酶标抗IBEV IgG 结合作用于酶底物，酶底物显色反应，借此可测出血中IgM 抗体的含量。 1.  用包被液稀释豚鼠抗兔IgM 抗体至l0 （g/ml，加至40 孔板，每孔0.2 m1。置湿盒37 ℃1 小时，再...

1.  取干净凹窝塑料板一块，用蜡笔做好标记，用带有橡皮吸头的吸管，于第2 至第9 孔内各加人生理盐水0.2 mL； 2.  于第1 ，第2 及第9 孔中各加入稀释成1：5 的流感病人发病早期血清0.2 ml （血清处理见附录），混匀后，从第2 孔吸出0.2ml 加入第3 孔，按同法稀释至第8 孔，吸出0.2 ml 弃去（血清稀释度分别为1：5~1：640）。 3.  在第1 至第8 孔中，各加入4血凝素单位流感病毒0.2...

有些病毒（如流感病毒等）表面有血凝素（为糖蛋白）在一定条件下，能与鸡，豚鼠的红细胞表面的糖蛋白受体结合而发生凝集现象。利用病毒血凝试验可以检测某些病毒的存在，滴定病毒的血凝效价，便可大致估计病毒颗粒的数量（1 个血凝单位=106病毒颗粒）。若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合后，使病毒失去凝集红细胞的能力，从而抑制血凝现象的出现，此为血凝抑制现象。 1.  取一块洗净晾干的20 孔凹窝塑料板，用蜡笔做好标记。用带有橡皮吸头的吸管，于1～6 孔内各加人生理盐...

注意选择动物种类，年龄。按病毒侵袭部位的不同，选择适宜的接种途径，例如脑炎病毒以注射脑内最敏感。接种后经一定潜伏期，动物发病或死亡即进行解剖。根据动物的症状表现，器官病理改变，受染脏器组织悬液能在同种动物进行连续传代，并排除其他微生物污染的可能性等，即可证明有病毒的增殖。 以无菌0.25 毫升注射器抽取脑炎病毒悬液0.1 毫升，去除注射器内的气泡。 取出小白鼠，左手将小白鼠固定，固定时用大拇指和食指握住小白鼠的头部，左手手掌轻轻按住小...

鸡胚培养方法操作简便，适用于流感病毒，痘病毒，疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种，即绒毛尿囊膜接种法，羊膜腔（羊水囊）接种法，尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。 1.  鸡胚的检查 将9～11 日龄鸡胚置于检卵器上，照视观察鸡胚是否生活，根据①小血管是否清晰；②胚胎是否活动，观察小鸡的眼睛黑点是否移动。如果鸡胚不动，血管昏暗模糊，变黑或苍白都表示已死亡。 ...

1.  病毒的电镜图像观察 观察腺病毒，轮状病毒，单纯疱疹病毒的电镜照片，注意其形态，排列，大小及其结构。 2.  病毒包涵体的观察 用高倍镜或油镜观察经HE （苏木素伊红染色）染色的狂犬病毒及呼吸道合胞病毒（或麻疹病毒）感染宿主细胞后形成的包涵体，注意包涵体在细胞内的大小，形态，位置及染色性，并绘图表示。 ...