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滤过除菌实验

滤菌装置的过滤部件由陶瓷、硅藻土石棉或玻璃粉等制成,其孔径小于细菌直径,能阻挡细菌通过。滤菌器的常用种类有蔡氏滤菌器、贝克菲尔滤菌器、玻璃滤菌器和薄膜滤菌器等。滤菌器主要用于不耐热的培养基、血清、药液等物质的除菌。 1. 将清洁好的滤菌器、滤瓶分别用纸或布包装好,高压蒸气灭菌。 2. 以无菌操作将滤菌器和滤瓶装好,并使滤瓶的侧管通过缓冲瓶与抽气机连接。 3. 将待滤液体倒入滤菌器内,开动抽气机。 ...

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干热(干烤箱)灭菌实验

干烤箱是由双层铁板制成的方形金属箱,夹层中充满石棉以隔热,箱底放置热源(电炉),并附有鼓风装置、温度调节器、温度计等。主要用于耐高温的玻璃器皿、油剂(如凡士林、液体石蜡等)、粉剂等物品的灭菌。 将待灭菌物品清洗、晾干后放置干烤箱内(不宜过挤,不得让物品与内层底版直接接触),关闭箱门,打开电源。温度上升到160℃~170℃时(箱内温度超过180℃时,试管塞和包装纸等会被烧焦甚至燃烧),维持2小时,停止加热。待温度自然下降到40℃以下时,方可开门取物,否则冷空气突然进...

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高压蒸气灭菌实验

高压蒸气灭菌器是一种坚固密闭的带内桶的蒸锅,密封盖上装有压力表、安全阀和排气孔等。锅盖密封旋紧后,对锅底的水进行加热,产生蒸气使锅内压力升高,从而提高锅中水的沸点和蒸气的温度。因高压蒸气的温度较高、释放潜热多、湿热穿透力强,故灭菌效果好。凡耐热耐湿的物品,如手术器械、敷料、生理盐水、普 通培养基、玻璃器皿等均可用此法灭菌。 使用时锅底贮水适量,将灭菌物品放入内桶,盖上锅盖,拧紧螺栓,打开排气孔,开始加热。加热过程中,待锅内冷空气完全排出后,关闭排气孔,继续加热...

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油镜的使用实验-油镜的使用实验

微生物学实验中最常用的是普通光学显微镜的油镜。油镜镜头透镜小,因此进入镜筒的光线极少。为了增加亮度,须在标本片与镜头之间滴加香柏油。因为香柏油的折光率与玻片很接近,可以尽量避免通过聚光器进入玻片的光线因折射而丢失,从而使得视野中的物像更加清晰。 1. 识别油镜头:标有“×100”、“×90”、“Oil”、“HI”等标记。 2. 对光:采用低倍镜对光。观察染色标本时须将光线调整到最强,抬高聚光器,放大光圈,外置光源的显微镜反光镜应选用...

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方案24.2 冻存活检组织实验

切取肿瘤,将肿瘤块浸于 DMSO,然后分量冻存于液氮中。 一、材料 无菌 1. 活检标本 2. 1.2 ml 塑料冻存管(Nagle Nunc) 3. DBBS 4.  收集液 5.  二甲基亚砜(如果放在一个无菌容器中,为半灭菌的) 6.  器皿(解剖刀、解剖镊、培养皿等,同为原代培...

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质粒DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定实验

1.  琼脂糖凝胶电泳装置 由于琼脂糖凝胶电泳既要求不高,而适应性又强,在过去15年里已成功地设计了形形色色及大大小小的电泳槽。对这些装置的选择主要是依据个人的喜恶。使用最普遍的装置是Walter Schaffner发明的水平板凝胶。 水平板凝胶通常在一块可安放于电泳槽平台的玻璃板或塑料盘上灌制。在有些装置中,则可将凝胶直接铺在平台上。凝胶恰好浸在缓冲液液面下进行电泳。凝胶的电阻几乎与缓冲液的电阻...

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缓冲溶液的配制及pH值测定实验

溶液pH值的测定,在自然科学各个领域中都有广泛的应用,在医药领域中有着非常重要的意义。例如合成或分析反应条件的控制,注射液或其他药剂的配制等,经常需要准确测定pH值。所以溶液pH值的测定是仪器分析中普及程度非常高的一种方法。 1. 基本概念  在一定程度上能抵抗外加少量酸、碱或稀释,而保持溶液pH值基本不变的作用称为缓冲作用。具有缓冲作用的溶液称为缓冲溶液。 2. 缓冲溶液组成及计算公式 缓冲溶液一般是由共轭酸碱对组成的,例如弱酸和弱酸盐,或弱碱和弱碱盐。如果缓冲溶液由弱酸和弱酸盐...

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考马斯亮蓝微盘比色法测定蛋白质含量实验

考马斯亮蓝G-250存在两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer?蒺s law)。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式变为蓝色形式,最大光吸收由465nm变成595nm,通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。 蛋白质和染料结合是一个很快的过程,约2min即可反应完全,呈现最大光吸收,并可稳定1h,之后蛋白质和染料复合物发生聚合并沉淀出来。蛋白质和染料复合物具有很高的消光系数,使得在测...

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质粒DNA的大量提取和纯化实验

1、取培养至对数生长后期的含pBS质粒的细菌培养液250 ml,4 ℃下5000 g离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽。 2、将细菌沉淀重新悬浮于50 ml用冰预冷的STE中(此步可省略)。 3、同步骤1方法离心以收集细菌细胞。 4、将细菌沉淀物重新悬浮于5 ml溶液I中,充分悬浮菌体细胞。 5、加入12 ml新...

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果品总酸度的测定实验

水果中富含有机酸,如乙酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸等,这些有机酸可以用碱标准溶液滴定,以酚酞为指示剂。根据所消耗的碱浓度和体积,即可求出果品中的总酸度: 有机酸%= CNaOH·VNaOH K/Mx×100% 式中:  Mx为实际滴定的试样量(g); VNaOH为滴定果品本身所消耗的NaOH标液量(ml); CNaOH为滴定果品NaOH浓度(mol/L); K为有机酸基本单元的式量MB×10-3,其取值参考下表 分析芸香科柑橘类果实和越橘科浆果时按柠檬酸计算。分析果、核果类及大部分浆...

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