活体法检测物体内硝酸还原酶活性实验
一、材料仪器设备及试剂 1. 材料:水稻或小麦的叶片、幼穗等。 2. 仪器设备:真空抽气泵;真空干燥器;小烧杯;玻璃瓶塞;其它用具同离体法。 3. 试剂及配制: 亚硝酸钠标准液()。 0.1mol·L-1KNO3()。 1%磺胺(配制方法同离体法); 0.02%萘基乙烯胺()。 ...
查看详情一、材料仪器设备及试剂 1. 材料:水稻或小麦的叶片、幼穗等。 2. 仪器设备:真空抽气泵;真空干燥器;小烧杯;玻璃瓶塞;其它用具同离体法。 3. 试剂及配制: 亚硝酸钠标准液()。 0.1mol·L-1KNO3()。 1%磺胺(配制方法同离体法); 0.02%萘基乙烯胺()。 ...
查看详情一、来源于哺乳动物细胞 1. 按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻融法,制备哺乳动物细胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制细胞方法来收集细胞,则将原位裂解法的步骤1至4用以下的步骤2至4代替。 2. 室温下,300 g 离心5 min,弃去上清。每10 7 细胞加入1 ml 低渗缓冲液,离心,弃上清。然后每10 7 ...
查看详情任何植物如果培养在单一种盐溶液中,不久即呈现不正常状态,最后导致死亡。这种单盐毒害现象,即使在浓度很低,而且是植物所必需的元素的单盐溶液中也会发生。尤其是阳离子的毒害更为严重,因为阳离子对原生质的理化特性及生理机能有巨大的影响,如K+能使原生质粘度变小,而Ca2+则能使原生质粘度变大。如果在这种单盐溶液中加入微量的其它一种盐(阳离子),便可减轻或消除单盐毒害。离子价数越高,其消除单盐毒害作用所需的浓度越低,这种现象称为离子间的对抗作用(拮抗作用)。 取三个25...
查看详情纸谱分析亦称滤纸层析,是将混合的溶液在滤纸上用层析溶剂加以分离的鉴定或定量的技术。层析溶剂由有机溶剂和水组成,其中水分子被滤纸的纤维素所吸附,成为固定相,而有机溶剂则成为推动相。当推动相沿滤纸移动时,样品中各种溶质因在二相中的分配系数(即在二相中溶解度的比例)不同而造成亲脂性较强的溶质移动较快,而亲水性较强的溶质移动较慢,结果使混合物分离。最后用显色剂对分离物进行显色鉴定。不同物质移动速率不同,故有不同的Rf值(比移率),可用作定性时参考。 纸谱分析有单向、双向之分。凡成分较简...
查看详情将根系浸入水中时水面升高,测出升高部分的水的体积,即可求出根系的体积。 1.测定根系体积装置 用橡皮管连接作为体积计的粗玻管及细玻管,后者固定在夹子上与水平面成一倾斜角度。角度愈小,仪器灵敏度愈高。体积计被固定在另一夹子上,其上固定一滴定管,整个装置右如图。 2. 根系体积的测定 (1) 加水入体积计内,水量以估计能浸没根系为宜。调节细玻管位置,使水面在靠近橡皮管的一端,在细玻管上作...
查看详情无水乙醇能使植物细胞迅速脱水、死亡,因而细胞壁硬化,细胞形状固定,气孔也得以保特原样,有利以后镜检研究,植物材料还可以长期保存。 1. 用镊子撕剥下叶子的表皮(可先用解剖刀切一小口以利撕取),迅速地(愈快愈好)放入无水乙醇中固定、保存。把固定好的表皮放在载玻片上,加几滴无水乙醇,盖上盖玻片,即可镜检。 2. 此法成功的关键在于动作迅速,整个过程(撕下浸入无水乙醇)应不超过1-2秒钟,否则保卫细胞的细胞壁不能快速脱水硬化而难以保持原有形...
查看详情把有机溶胶涂在植物的表面,胶体风干后就凝成薄膜,这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹,从而显示出气孔的开闭情况,此法除用来观测气孔外,还可用于观测表皮组织上的细胞,茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。 1. 取牛皮胶5-10g,放入100 ml水中,加热至70-80℃使成溶胶。如冷却后变成凝胶,可加适量水并再加热使之成溶胶。如需保存较长时间,可加数滴防腐剂如甲苯于溶胶表面,这样还可防止溶胶水分蒸发。 2. 将溶胶涂抹于叶面成薄层,等待数分钟...
查看详情1. 60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞,用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液,在室温下温育2~5 min。 2. 吸去低渗缓冲液,加入400 μl Triton裂解液。用橡胶刮子将细胞刮离培养血,用1 000 μl 移液器将裂解物移入1.5 ml 微量离心管中。 3. 微量离心1 min 除去细胞核,不可溶性蛋白。将上清转入一个干净的微量离心管中, 进行CAT活性分析。 ...
查看详情各种液体对植物叶片的湿润力不同,湿润力愈强的液体,就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。 1.在室外取自然生长的叶片,于叶背中脉任意一侧依次滴上一滴液体石醋、无水乙醇、苯、二甲苯(应注意不同液体要滴在相近部位,但不可在同一处滴二种液体)。四种液体的湿润力分别是:液体石醋< 无水乙醇< 苯 <二甲苯。 2. 根据各种液体渗入的情况,确定气孔张开度,液体石醋能渗入者为大开,液体石醋不能渗入但无水乙醇...
查看详情叶片上的气孔是二氧化碳和气态水分子进出的主要通道。叶表面气孔虽然很多,但面积很小,只占叶片总面积的1~2﹪,可是,水分通过气孔而散失的速度(即蒸腾速率)却很快。有些植物当叶表面的气孔充分张开时,其蒸腾速率接近于叶片同样大小的自由水面的蒸发速率。这样高的效率是小孔扩散的边缘效应造成的。在任一蒸发面上,处于蒸发面中心的气体分子由于分子间的相互干扰,向大气扩散的速度较慢,在蒸发面边缘的气体分子则因干扰少而扩散较快。孔愈小,周长与面积的比例愈大,边缘效应愈显著。所以,若以同样的蒸发面积计算...
查看详情