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辐射对植物染色体的诱变作用实验

物理射 线的电离辐射,具有非常短的波长以及相应的较大频率,其穿透力很大,在空气中γ-射线,射程可达几百米,速度为30万公里/秒。因此,对植物给予一定剂量的照射,很容易引起基因突变和染色体畸变,常见的有染色体粘着,着丝点区域断裂,破坏纺锤丝形成,染色体或染色单体的断裂等细胞学现象。可通过细胞分裂观察到这种现象。 在实际工作中,选择合适的剂量是很重要的。一般要求尽量减少对植物的生理损伤,提高遗传方面的效应,以有效地选择优良的变异类型和个体。 一、实验材料和实验用品...

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非同位素分析报道基因活性实验-冻融裂解的细胞的荧光素酶分析

1.  用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。 2.  每只培养皿中加1 ml 提取缓冲液,立即用橡胶刮子刮下细抱,移至1.5 ml 微量离心管中。离心15~30 s,弃上清。 3.  在细胞沉淀中加100 μl 提取缓冲液,经3次冻融裂解细胞膜。 4.  将裂解的细胞在4℃以最大速度离心5 min,移出上清,分析其荧光素酶的活性。 ...

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植物花粉母细胞减数分裂制片实验

减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次的细胞分裂,第一次分裂是减数的,第二次是等数的。第一次分裂的前期较长,染色体变化较复杂,可细分为5个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。染色体在减数分裂的行为对遗传物质的分配和重组产生重大影响。 高等植物在形成雄配子的过程中,花药内的小孢子母细胞(2n),经过减数分裂最终产生四个小孢子。每个小孢子内的染色体数目已减半为n。以后每个小孢子进一步发育为花粉粒。由于植物花药取材容易,操作方便,一般...

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植物花粉母细胞减数分裂的染色体观察实验

减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中一种特殊的细胞分裂方式。在这个过程中,染色体复制一次,细胞分裂两次,最终形成的配子染色体数目比母细胞减少一半。雌雄配子受精结合后代又恢复正常的染色体数目,从而保持了物种在遗传上的稳定性;同时由于减数分裂中同源染色体的非姊妹染色单体的交换为后代的变异提供了基础。 减数分裂包括减数第一次分裂和减数第二次分裂两个连续变化的阶段。每个阶段根据细胞和染色体的变化特点分为前期、中期、后期和末期四个时期。由于减数第一次分裂的前期较长,染色体变化也比较复杂,所...

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非同位素分析报道基因活性实验-萤火虫荧光素酶法

1.  用冰冷的PBS洗涤在3个60  mm 培养皿中的转染了荧光素酶表达质粒的细胞各3次, 毎次用4  ml PBS洗后吸去洗液。 2.  每个培养皿中加入350 μl Triton/甘氨酰甘氨酸裂解液。用橡皮刮子刮下细胞,将溶解的细胞转入1.5 ml 微量离心管中。4℃以最大速度微量离心5 min。将上清(细胞裂解液)转入一个干净的微量离心管中,置于冰上以备分析。 3.  在旋涡混合器上轻轻振荡细胞裂解液,取...

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荧光法测定种子生活力实验

植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很容易外渗。前一种情况可以用直接观察种胚荧光的方法确定种子生活力,后一种情况则可通过观察荧光物质渗出的多少来确定生活力。 一、材料、仪器设备 1. 材料:...

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酸性靛兰染色检测种子活力实验

活种子胚细胞的原生质膜具有半透性,具有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入活细胞内,胚部不能被染色。而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可以自由进入细胞内而将死胚染色(如酸性靛兰 、红墨水等),故可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。 一、材料、设备及试剂 1. 材料:大麦、大豆等作物新种子和贮存三年以上的陈种子。 2. 设备:培养皿,刀片,镊子,烧杯。 ...

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血基因组DNA提取实验-血基因组DNA 试剂盒提取法

本试剂盒采用特殊的细胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)从抗凝全血中得到基因组DNA。适用于从冻全血、血浆、血清、骨髓、其他体液、淋巴细胞、培养细胞、病毒和线粒体中提取DNA。 一、试剂盒组成、贮存、稳定性 1.  说明书,耗材:96孔深孔板(1.6 ml),96圆孔板,96孔DNA制备板,96圆孔硅胶片,BF-400膜。 2.  Proteinase K:冻干的蛋白酶K 可室温贮存6 个...

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水稻种子萌发对氧的需要实验

水稻系淹水植物,对缺氧环境有一定的适应能力,但适应方式主要是借助发达的通气组织使根系得到从地上部运来的氧气。水稻种子能在氧气不足的水中萌发,这是一般作物如小麦、玉米所不能的。但在缺氧严重的情况下,其胚根和真叶也不能正常生长,只能长出细长的芽鞘。由于芽鞘迅速伸出水面,便可将空气中的氧气运至基部,而利于发根和长叶。 1. 种子处理 选取饱满的水稻种子,用0.1﹪升汞溶液进行表面消毒10min,再用清水充分洗净种子,然后浸种几小时。 ...

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叶绿素的理化性质测定实验

叶绿素是一种二羧酸的酯,可与碱起皂化作用,产生的盐能溶于水,可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开。叶绿素与类胡萝卜素都具有共轭双键,在可见光区表现出一定的吸收光谱,可用分光镜检查或用分光光度计精确测定。叶绿素吸收光量子后转变成的激发态叶绿素分子很不稳定,当它回到基态时,可以发出红光量子,因而产生荧光。叶绿素的化学性质也很不稳定,容易受强光的破坏,特别是当叶绿素与蛋白质分离后,破坏更快。叶绿素分子中的镁可被H+所取代而成为褐色的去镁叶绿素,后者遇到Cu2+可形成绿色的铜代叶绿素,这种叶绿...

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