1.  接种细胞（见“脂质体介导短暂表达”步骤1）长至50%汇片。 2.  制备DNA/脂质体混合物，转染细胞（见“脂质体介导短暂表达”步骤2和3）。 3.  每孔细胞加入1 ml DMEM-20完全培养液，37℃ 培养箱培养48 h。 4.  吸去DMEM，稀释细胞分传于选择培养液中。将细胞培养适当时间以选择真正被转染的细胞克隆。 ...

生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的细胞原生质膜丧失这种能力，于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞，而胚乳细胞全部被红墨水染成红色，那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞？所以染色机理不但与质膜透性有关，而且还与细胞（胚细胞和胚乳细胞）本身的结构和物理性质有关，是一个有待进一步研讨的问题。 1．操作：取TTC法余下的一半种子，置培养皿中，加入5%红墨水染色15分钟，倒去红墨水，然后用自来水冲洗3－...

有生命活力的种胚呼吸过程中不断进行氧化还原反应，脱下的氢使辅酶（NAD或NADP）还原。当TTC渗入种胚的活细胞内，作为氢的受体被还原性辅酶（NADH+H+或NADPH+H+）上的氢还原时，便由无色的氯化三苯基四氮唑（TTC）变为红色的三苯基甲臜（TTF）。 一、材料和设备 小麦、玉米、花生或水稻种子 恒温箱、培养皿、刀片、镊子 0.1%TTC溶液：称取0.1克TTC先加少量95%乙...

凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用，吸收空气中的O2，同时放出CO2，CO2溶于水生成H2CO3，H2CO3不稳定解离成H+和HCO3－。由于H2CO3不断解离，就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图：   它的变色范围为pH6.0－7.6之间，它在酸性介质中呈黄色，在碱性介质中呈蓝色，中间经过绿色（变色点为pH7.1）。 一、材料和设备 玉米或小麦种子 恒温箱...

硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶，与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3－还原为NO2－的反应： NO3－+NADH+H+→NO2－+NAD++H2O 反应产生的NO2－可从组织内渗透到外界溶液中，定时测定一定的反应溶液中NO2－含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2－的定量测定是用磺胺比色法。此法简单易行而又非常灵敏，可测出0.5微克/  ml NaNO2含量的变化。 一、材料和设备 蓖麻、烟草、向日葵、油菜、小...

单盐毒害和拮抗作用与原生质及原生质膜中的亲水胶体有关，离子价数越高，其消除单盐毒害作用所需的浓度越低。矿质离子特别是阳离子，对原生质的理化性质和生理机能有巨大影响。当某一种离子单独存在时，常能破坏原生质的正常状态而发生毒害作用；如果在单盐溶液中，加入少量的其它盐类，则产生拮抗作用而消除毒害。 一、材料与药品 1．材料：真叶尚未出鞘的小麦或水稻幼苗。 2．仪器：烧杯6只；蜡布或蜡纸（大小以能蒙在烧杯上为准）；量...

1.  按5×10 5 细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞，在37℃ 5%CO 2 培养箱中 培养过夜，直至细胞80%汇片。（如果用100 mm 培养皿代替六孔扳，则培养细胞至80%汇片，将所有数量扩大8倍） 2.  在聚苯乙烯管中配制DNA/脂质体复合物如下：稀释质粒DNA至1 ml DMEM-SF中，在旋涡混合器上振荡1 s 然后加入脂质体悬液、再次旋起混匀。在室温...

取新鲜马铃薯去皮，切成5mm见方的小块，分为两组，分别放在2支试管中，其中一组煮沸20分钟，然后分别加入5ml 3% H2O2溶液，观察有什么变化，并加以说明。 几分钟后，在未经煮沸的试管中，加10滴新鲜的邻苯二酚酒精溶液，观察有什么变化，并加以解释。 ...

过氧化物酶是卟啉环中含有铁的金属蛋白质。过氧化物酶与过氧化氢形成一种化合物，在这种化合物中的过氧化氢被活化，从而能氧化酚类化合物，其作用如同氢的受体一样。 马铃薯块茎，切碎，加到两个试管中，其中一个先煮沸数分钟，然后各加入10滴新鲜配制的1.5%邻苯二酚酒精溶液和5ml 3%H2O2溶液，如有褐色发生，即表示过氧化物酶的存在。 另取一支试管，只加H2O2及邻苯二酚酒精溶液，观察有何结果。 ...

氧化酶能从代谢物上脱氢，并使其与氧直接结合，生成水或双氧水。如细胞色素氧化酶、抗坏血酸氧化酶、多酚氧化酶等。 一、材料与设备 材料：马铃薯块茎、豌豆叶、洋葱、甘薯及黄瓜等，20ml刻度试管2支、电炉 试剂：1.5%邻苯二酚酒精溶液：1.5g邻苯二酚溶于足够的95%酒精溶液，定容至100ml。 二、实验步骤 1．取去皮的新鲜马铃薯少量，切碎。 ...