哺乳动物细胞基因稳定转染的实验
1. 确定所要转染的细抱系能呈独立集落生长。对于贴壁细胞,在10 cm组织培养培养皿中接种约100个细胞,培养10~12天,毎4天换液1次。亚甲蓝染色后对成活的细胞集落进行计数。 2. 确定母代细胞的选择条件:将一培养皿上生长汇片的细胞按不小于1:15的比例分传于含有不同药物浓度的培养液中。培养10天。用合适的选择培养液每4天换液1次, 并检查活细胞。 3. 确定转染母代细胞的最有效的方法。可选用磷酸钙或电穿孔方法。对于...
查看详情1. 确定所要转染的细抱系能呈独立集落生长。对于贴壁细胞,在10 cm组织培养培养皿中接种约100个细胞,培养10~12天,毎4天换液1次。亚甲蓝染色后对成活的细胞集落进行计数。 2. 确定母代细胞的选择条件:将一培养皿上生长汇片的细胞按不小于1:15的比例分传于含有不同药物浓度的培养液中。培养10天。用合适的选择培养液每4天换液1次, 并检查活细胞。 3. 确定转染母代细胞的最有效的方法。可选用磷酸钙或电穿孔方法。对于...
查看详情乙烯是五大类内源激素之一,也是唯一的气体激素。几乎所有的植物组织都具有产生乙烯的潜能。乙烯对植物具有多方面的生理功能,其中最主要的包括:促进果实成熟,对茎生长的"三重反应",加速脱落和衰老,诱导雌花形成等等。 已经知道,乙烯可以改变膜的透性和细胞的分室作用,诱导许多酶类(尤其是降解酶类)的合成、释放或是活化等,这是乙烯促进成熟与脱落的主要原因之一。在乙烯的作用过程中,还常常观察到新的RNA和蛋白质的合成,说明乙烯在基因调控水平上起作用。 外源乙烯具有和内源乙烯几乎完全相同的生理效应...
查看详情乙烯是一种气体激素,它对植物的代谢,生长和发育有着多方面的作用。用乙烯气体处理黄化的豌豆幼苗,可抑制幼苗上胚轴的伸长,并使上胚轴发生膨大及横向生长。黄化幼苗对乙烯的这三种反应被称为“三种反应”,并可作为对乙烯的一种诊断性鉴定方法。 这种方法是根据乙烯的主要生理作用建立的。据报导,乙烯可使细胞壁内表面在纵向方向沉积的微纤维增多,这样就限制了细胞的纵向延伸,加强了细胞的横向扩大,从而表现出上胚轴伸长受限制及横向膨大现象。横向生长是由于乙烯抑制了生长素从上胚轴靠上一边向靠下一边的侧向运输...
查看详情细胞分裂素有促进萝卜子叶增大的效应,其主要原因是促进细胞分裂和扩大。在一定浓度范围内(6-BA激动素为0.05到50pp M ),子叶增重与浓度成线性关系。 一、材料与设备 大小均匀的萝卜种子 9cm 培养皿,滤纸,镊子,搪瓷盘,移液管:5 ml 2支,0.5 ml 1支 药品 0.5%次氯酸钠溶液 100pp M 激动素溶...
查看详情在植物中广泛存在细胞分裂素。它能促进细胞分裂,抑制核酸酶,蛋白酶等一些水解酶的活性,使大分子物质少受破坏。用细胞分裂素处理正在衰老的叶片,能阻止叶绿素的破坏,延长叶片寿命。 把植物的离体叶片放在适宜浓度的细胞分裂素溶液中,置于25-30℃黑暗条件下,叶片中叶绿素的分解比对照慢,证明分裂素具有保绿作用。 一、材料与设备 小麦幼苗 直径8cm 培养皿,10 ml 量筒,100 ml 量筒,药物天平,小漏斗,小...
查看详情一、腺苷脱氨酶(ADA) 1. 选择条件:培养液中加10 μg/ml 胸腺嘧啶脱氧核苷,15 μg/ml 次黄嘌呤,4 μmol/l 腺嘌呤-9-β-D-呋喃木糖苷(Xyl-A),及0.01~0.3 μmol/l 2‘-脱氧助间型霉索(dCF)。胎牛血清中含有ADA可解除培养液的毒性,所以在用前才加入培养液中。 2. 选择原理:Xyl-A可转化成...
查看详情生长素(吲哚乙酸)能促进燕麦胚芽鞘细胞的伸长。在切去顶端的芽鞘切段断绝了生长素来源的情况下,切段的伸长在一定范围内与外加生长素浓度的对数呈线性关系,因此,可以用一系列已知浓度的生长素溶液培养芽鞘切段,绘制成生长素浓度与芽鞘伸长的关系曲线,以鉴定末知样品的生长素含量。 一、材料和设备 小麦或燕麦种子 培养皿,滤纸,细玻璃丝,镊子,简易切割器,刻度吸管,带方格纸的玻璃板,恒温箱,搪瓷盘,暗室。 ...
查看详情结果讨论 根据实验结果讨论单子叶植物与双子叶植物在根,茎,叶的生长方式上有何异同点? 当玉米幼苗出现4-5片叶时,选两株幼苗,在幼叶的露出部分用绘图墨水划上5毫米间隔的细线,另用解剖针从幼苗基部起每隔5毫米穿一小孔。1-2周后,观察叶片各部位的生长情况,绘图表示。重新测量各道线之间的距离及出现在新叶片上的小孔的间隔,列表记录结果,说明单子叶植物叶片的生长区域在叶子的哪一部分。观察时注意单子叶植物叶片的顶部与基部的老嫩情况有何不同。...
查看详情结果分析 详细阐明双子叶植物叶片的生长区域分布在叶片的哪些部位? 选取向日葵幼苗顶部尚未充分展开的幼叶3-4片,用特制橡皮图章打上2毫米见方的小格。操作时应尽量小心,既要使印迹清楚,又不要擦伤叶片。3-6天后,观察叶片顶部、中部及基部小格宽度的变化,绘图表示。 ...
查看详情选取顶部节间尚未充分伸长的双子叶植物幼苗两株,直接在小盆内从生长点下面开始在茎上划线十道,彼此间隔2毫米,将小盆放在温暖处,经常浇水,以保持土壤湿润。3-6天后观察茎的生长情况,绘图表示,并测量各道线间距离,列表记录结果。 ...
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