异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba（OH）2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大部分DNA，Giemsa染色后可见效果良好的C带。 抽取DNA的过程由三个连续操作形成。首先，酸处理可使DNA脱嘌呤，但未使DNA骨架断裂；其次热碱处理可使DNA变性，促进继发的DNA溶解；最后，热盐...

一、原代培养 1.  选用生后1周的新生大白鼠，用碘酒,酒精棉球消毒，断头取其大脑皮层组织。 2.  解剖显微镜下，剥离脑膜，切除大脑髓质部分。 3.  将大脑皮质在无Ca 2+ 、Mg 2+ Hanks液(CMF-Hanks液)中剪碎。 4.  室温下静置1...

运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 一、实验步骤 1.  要用胎牛血清。开始用的是小牛血清，所以总是不成功，培养基换为 DMEM/F12，但后来我又换成 DMEM，也培养出来了。 2.  把脐动脉剪开很麻烦，因为它老是打弯，可以找个软木塞，用大头针固定，可用块木板，因为有磨擦力，所以动脉可以固定在板上。 ...

运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 一、实验步骤 1.  冰冷无菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔细清除脂肪、包膜、血管等组织，转入青霉素小瓶中，加入少量无菌D-Hanks’液，用眼科剪剪成0.1-1.0 mm 3 大小的碎片。 2.  用滴管轻轻吸出上层细小脂...

脱落细胞法是指采集人体各部位，特别是管腔器官表面的脱落细胞进行培养。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞和在体外培养的肿瘤细胞，其差异较小，但也并非完全相同。培养中的肿瘤细胞具以下突出特点： 1.  形态和性状 培养中癌细胞无光学显微镜下特异形态，大多数肿瘤细胞...

本法是利用成纤维细胞对胶原酶较为敏感的特点，通过消化进行选择。可用0.5mg/ml的胶原酶消化处理，边消化边在倒置显微镜下窥视，当发现成纤维细胞被除掉后，即终止消化；用Hanks洗涤处理一次后，更换新培养液，继续培养，可获纯净肿瘤细胞。如成纤维细胞未被除净，可再次重复。 一、肿瘤细胞培养成功关键 肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常...

肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子。 一、对肿瘤细胞系或细胞株的评价 已建成的各种肿瘤细胞系或细胞株，无疑都是可用的实验对象。近年我国已建成的肿瘤细胞系已非常...

利用一系列不同浓度的DNA标准溶液（0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml），或已知浓度的DNAmarker，和未知浓度DNA样品一起进行琼脂糖凝胶电泳，以EB染色后，在凝胶图象分析仪上观察，比较标准浓度及未知浓度的亮度，来求取DNA的含量；比较DNA样品与DNA marker条带位置，推知DNA 样品分子量。 1.  称取1.5 g 琼脂糖加入盛有100 ml 0.5×TBE电泳缓冲液三角瓶中，摇匀，在微波炉上加热至琼脂糖完全溶解。加入溴...

1.  接种一个单菌落于5 ml LB培养液，37℃温和振摇培养5 h 或过夜。 2.   将2.5 ml 培养物加人到盛有500 ml LB培养液的2 L 烧瓶中，37℃摇匀振荡培养至OD 600 为0.5~0.6。 3.  细菌在冰水浴冷却10~15 min，然后转移到预冷的1升离心瓶中。于2℃，5 000 g 离心20 min 沉淀用5 ml 预冷的水...

一、制备前——培养细胞 1. 培养细胞用0.25%的胰酶消化。 2. PBS或生理盐水洗涤细胞2次，再用PBS或生理盐水悬浮细胞，加入预冷的无水乙醇，终浓度为60%～70% ，快速混匀，并用封口膜封口，置4℃下可保存15天左右。 二、制备 1. 取1×106个细胞/100μl，先加入一抗混匀，置室温下避光反应30min。 2. 用PBS洗涤细胞2...