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凝血酶时间(TT)测定试验

待测血浆加入适量凝血酶溶液,纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白测定凝固所需的时间,即为待测血浆凝血酶时间(TT).该实验系检查受试者血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白能力的过筛试验. 一、实验方法: 1、试剂重建与保存 每瓶TT试剂加入2.5ml蒸馏水轻摇溶解,得到约5微升/ml凝血酶溶液。 实验注意:试剂溶解后2-8℃保存7天,4小时内-20℃冻存,可稳定30天,复溶的请于37℃迅速融化. ...

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活化部分凝血活酶时间(APTT)测定实验

待到血浆加入部分凝血活溶液,在Ca2+参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血活酶时间,(APTT).APTT测定是内源性途径凝血因子的定量试验,可检测除Ⅶ因子外的其他血浆凝血因子,特别是用于因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前肽释放酶的测定,同时,APTT测定可用于肝素治疗监控. 一、材料试剂: 标本的来源与保存: 静脉采血,置含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液(...

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TRIzol RNA提取方法

Trizol是直接从细胞或者组织中提取总RNA的试剂,内含异硫氰酸胍、酚等物质。 异硫氰酸胍能迅速溶解蛋白质,导致细胞结构破碎。核酸由于核蛋白二级结构的破坏而解离下来。 异硫氰酸胍同时抑制细胞释放出来的核酸酶,保持RNA的完整性。在酚和氯仿的作用下离心,样品分为水相层和有机层,RNA存在于 水相 层中。收集上面的水相层后,用异丙醇回收 RNA. ...

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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光斑点试验

在葡萄糖-6-磷酸(GbB)和NADP存在下,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)能使用NADP还原成NADPH,后者在紫外线照射下不会发出荧光。 一、 实验试剂:混合试剂的成人与配方: 0.1mol/L    G6P     1ml 7.5mmol/L     NADP  1ml   0.7mol/L    tris-HCl(PH7.8)3ml 8mmol/L       氧化型谷胱...

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热溶血试验

本试验是利用患者的红细胞在自身的血清(含补体)中于37℃孵育后,由于葡萄糖分解产酸使血清醇化,从而导致溶血发生. 以无菌干燥注射器取静脉血2ml,取下针头,缓缓地沿管壁注入消毒小试管中,避免产生气泡,加入少许消毒石蜡覆盖,置37℃孵育箱保温24小时,取出离心沉淀. 观察上清液颜色,如出现溶血为阳性,正常为阴性. 注意事项 附注:注射器要干燥,小试管要清洁,操作过程要避免发生溶血否则会导致...

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尿含铁血黄素染色 Rous试验

与骨髓铁染色的普鲁氏蓝反应同一原理。 尿离心沉淀,倒去大部分上清液,将管底沉淀物摇匀,加lml 4%酸性低铁氰化钾室温下作用10分钟时摇动,再离心沉淀,取沉淀l滴置载玻片上,加盖片后高倍镜检,另一种方法先将尿沉渣作成涂,干后按骨髓铁染色方法染色检查高倍镜检查尿中含铁血黄素呈游离蓝色圆形小粒或在上皮细胞内,如发现在上皮细胞内.其意义更大,因为铁染色过程中人为的蓝色沉淀物不致存在于细胞内. 注意事项 在血管内溶血反应发作的...

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蔗糖水溶血试验

在PH7.4时,人红细胞能从同血型正常人血清中吸附补体,但不发生溶血.PNH红细胞则发生溶血,PNH(阵发性,睡眠性血红蛋白尿症).红细胞对激活性补体,易于溶血.蔗糖能通过C3前活化素系统激活补体经典途经后而引起溶血。 一、 实验试剂:92.4g/L   蔗糖溶液. 二.、实验操作:取新鲜抗凝血(枸橼酸盐或草酸盐抗凝〕0.5ml加入45ml蔗糖溶液中,混匀,置于 37℃孵育箱中30min后取出离心,上清液呈红色为阳性(溶血)上清液无色...

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特异性酯酶:氯乙酸 AS-D萘酚酯酶(NCE)染色实验

细胞内酯酶水解合成的底物萘酚酯(一种萘的衍生物)而释放出萘酚,并迅速与重氮盐偶联结果在酶活性部位有明亮色彩的沉淀物出现. 一、实验试剂: (一)底物混合液 (1)0.067mol/L  磷酸盐缓冲液(PH7.6) (2)六偶氮化新品红(hexoliaed  new   fuchsin)溶液(新鲜配制) ①溶解新品红(new  fuchisn)1g于2mol/...

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鲑精担体DNA制备实验

1.  将TE缓冲液加入装有干燥鲑精DNA的烧杯中,至鲑精DNA浓度为5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反复吹打后,用搅拌棒于4℃搅拌过夜,最终获得一种均匀粘稠液体。 2.  将一个较大的超声波探头插入烧杯液体中,通过超声波将DNA剪切至2~15 kb(平均7 kb )大小的DNA片段。 3.  用缓冲液平衡酚抽提,将经剪切的鲑精DNA溶液移50 ml 锥形管中,加入等体积缓冲液平衡酚,混匀后于3 000 g...

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高碘酸-雪夫氏反应实验

PAS反应显示糖类的原理是由于含有乙二醇基的多糖类,在过碘酸的作用下,氧化产生醛基,此醛塞进而与Schiffs液作用便无色品红变成紫红色染料而附着于含有多糖类的组织上. 碱性品红+2H2SO3→品红亚硫酸(无色)     品红亚硫酸+带醛基物质→无色物 一、实验试剂: 1. 标本选择:一般可用于新鲜干燥的涂片,未染而长期储存的标本也可用。如用瑞氏法染过的标本,先用酸酒精脱色然后进行PAS染色亦可. Schif...

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