一、在平板上形成孢子 1.  挑或选择性平板上的酵母菌单菌落接种在孢子形成平板上。 如果无需选择的活，细胞在转移到孢子形成平板之前，可以在YPD平板上先培养几天。单个菌落在YPD平板上生长3~4天，而对小块细胞来说，可在平板上生长2天，这种预生长并非必需的，但它可以使孢子形成的效率更高些，在转移酵母细胞时，应用少量细胞在孢子形成平板上涂布相对较大的面积，不应见到成团的接种物。 ...

1.  除了于65℃在杂交液Ⅰ中温育的条件外，预杂交按甲酰胺法进行。 2.  按甲酰胺法制备探针并用2 ml 杂交液Ⅰ稀释。 3.  滤膜在65℃杂交过夜，然后移去杂交液，用低严紧性洗膜液Ⅰ洗膜2次。 4.  用高严紧性洗膜液Ⅰ在65℃迅速洗膜5~8次。 5.  最后一次洗膜延时到20 min，洗涤后的滤膜的非特异性信号达到仅比背景高几倍的水平。 ...

1.  在培养基中细胞的密度可以通过分光光度计测定的菌液在600 nm 波长的光密度OD 600 值来放映。 2.  要得到可靠的测量结果，菌液最好稀释到OD 600 值1以下，在这个范围内，毎0.1OD 600 相对于约3×10 5 ...

1.  酵母菌用接环划线或涂布在平板上生长。 2. 如果将野生型单倍体酵母菌稀释液涂布在YPD平板表面，并于30℃培养，那么在24小时后即可见单个菌落，但是如果要挑菌落或影印平板的话，需要培养48h 以上。 3.  用省却成分培养基吋，培养酵母菌的时间要长一倍。 ...

1.  在30℃，氧气充足和以葡萄糖作碳源的条件下，野生型酿酒酵母菌生长得十分良好。当酵母菌在试管中培养时，接种酵母菌贮液后应轻轻振荡培养液以便菌体细胞分散均匀。 2.  在作大体积液体培养时，酵母菌在锥形瓶中生长较好，使用瓶底具隔板的烧瓶增加进氧量更有利于酵母菌的生长。 3.  培养酵母菌时很重要的一点就是要保证所有玻璃器皿无任何表面活性剂。还要保持良好的通气条件，培养液不应超过整个烧瓶总体积的1/5，而且...

1.  配制30%的甘油溶液，在每个15 mm×45 mm，4 ml 的带盖的冻存管中加入1 ml甘油溶液，轻轻拧上螺盖，高压灭菌15 min。 2.  为了在冻存管中配制冻存菌液，加入1 ml 对数后期或静止早期的培养液，混匀后置干冰中一段时间，然后转存到-70℃冰箱中。 3.  复苏菌株时，可以从冻存管中刮下少量细胞划在平板上，不要将整个冻存管中的贮存液融化。 4.  细胞也可以按菌悬液...

一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中，或取其分泌液，若标本是组织块，可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种，取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 混种法：在制备半固体培养基时，培养基加热溶化，温度降至50℃时，添加动物血清、酵母浸液及青霉素后混匀，待冷却至37~40℃时，用无菌滴管吸取标本0.5~1 ml加入培...

一、附录 糖酵解培养基（肺炎支原体培养基） 基础培养基 70 ml 马（或牛血清） 20 ml 25%酵母浸液 10 ml 0.4%酚红 0.5 ml 1%醋酸铊 2.5 ml 青霉素10000 IU/ml 5.0 ml 调pH 7.8 一、标本采集 ...

鲎是一种海洋节肢动物，血液中含有一种变形细胞，此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应，即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活，使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。 一、材料 1.  鲎试剂(即装于安瓶内的鲎变形细胞裂解物的冻干制品)。 2.  待测物(血液、细菌培养上清液或注射剂等)。 3．标准内毒素(大肠杆菌内毒素含量100 ng/ml)...

一、细菌生化反应常用培养基的制备 1.  蛋白胨水 成分：蛋白胨1.0 g、氯化钠0.5 g、蒸馏水100 ml。 将上述成分加热溶解后校正pH7.6，分装试管，15磅15 min高压灭菌备用。常用于制备糖发酵培养基或用于检查细菌的靛基质产生试验等。 2.  糖发酵管 成分：蛋白胨水，葡萄糖、乳糖、甘露醇、蔗糖或麦芽糖等糖，溴甲...